为研究寡核苷酸芯片在确定梨品种S基因型中的应用价值,根据梨自交不亲和基因的结构特点设计了部分S基因的检测探针,并制成寡核苷酸芯片;采用引物Cy3荧光标记法标记检测样品的PCR产物并进行杂交,以检测不同样品的S基因型。结果表明:通过对不同杂交温度、杂交时间等的探索获得了较好的反应条件并用制备的芯片检测了已知S基因型的梨样品,检测结果与各品种的已知基因型相符。证明寡核苷酸芯片检测梨品种的S基因型是一种切实可行的检测方法,若对芯片进一步完善,则今后在梨的自交不亲和性状的机理研究及梨自交不亲和性状的利用等方面将有着广阔的应用前景。
本研究以苹果‘寒富’品种及其亲本为试材,研究其自交亲和性并鉴定其S基因型。田间授粉试验结果显示,‘寒富’品种表现为自花结实,其母本‘东光’品种亦自花结实;而父本‘富士’品种自花授粉结实率极低,初步推断‘寒富’品种的自花结实性可能遗传自其母本‘东光’。利用PCR技术鉴定'寒富'品种S基因型为S1S9。由于‘东光’品种存在同名异物问题,本研究除日本‘东光’品种外,对辽宁省果树研究所、吉林省果树研究所、沈阳农业大学等单位保存的中国'东光'品种的S基因型进行了鉴定,发现除辽宁省果树研究所保存的'东光'品种S基因型为S2S19,与‘寒富’品种无亲缘关系外,其它两个单位保存的'东光'品种中均存在S9基因型,可能为'寒富'杂交育种时的原始母本。
以 ‘Old Home’ 梨无菌苗叶片为外植体, 利用根癌农杆菌介导将专一在韧皮部表达启动子AtSUC2 驱动下的GUS 基因转入 ‘Old Home’中。筛选出了‘Old Home’ 梨叶片高效遗传转化的最佳条件:农杆菌和外植体在液体培养基上共培比在固体培养基上共培转化率提高5倍。 PCR分析和Southern 杂交鉴定表明GUS 基因已整合到转基因植株的基因组中,组织化学检测和Western 杂交鉴定证明了GUS 基因在转基因植株韧皮部中的表达。
逆转座子序列信息的获得,对了解其在基因组中的行为及系统学研究有重要价值。本试验从罗田甜柿(Diospyros kaki Thunb. 'Luotian-tianshi')基因组中分离31个RNaseH-LTR(Long Terminal Repeat,长末端重复)序列,并利用IRAP(Inter-Retrotransposon Amplified Polymorphism,逆转座子间扩增多态性)技术对部分序列相应的逆转座子家族在柿属植物中的转座活性及分布情况进行初步探讨。序列分析结果表明,至少有10个Ty1-copia类逆转座子家族得到扩增;其家族间普遍表现高度异质,碱基替换、插入或缺失突变,以及翻译成氨基酸后发生不同程度的终止密码子突变、氨基酸取代和移框突变等,是产生高异质性的原因;此外,其家族内部某些序列间的相似性极高,可能是寄主基因组与逆转座子间互惠关系的体现。应用部分逆转座子引物的IRAP分析结果表明,相应的逆转座子家族在柿属植物中普遍存在,其分布广泛,拷贝数高,转座活性强,具有进一步开发为多种逆转座子分子标记的潜力。
将砂糖橘(Citrus Reticulata Blanco CV. Shiyueju)果实置于1℃、3℃、6℃和9℃下贮藏,比较其贮藏效果及冷害对果实品质的影响。结果表明:砂糖橘最适贮藏温度为6℃,在1~3℃温度贮藏易发生冷害。冷害导致果实外观品质下降,果肉乙醛和乙醇含量累积,果肉异味,品质下降。1℃贮藏果实的呼吸强度和乙烯释放速率较6℃高,丙二醛(MDA)含量增加,丙酮酸脱羧酶(PDC)和乙醇脱氢酶(ADH)活性大幅度提高。说明在冷害温度下,砂糖橘果肉异味是由于乙醛和乙醇累积,而果实呼吸强度的提高与PDC和ADH活性的增加密切相关。
以'早红'、'红日' 紫甘蓝为试材,分别用Unispec型光谱仪和Ciras-2型光合作用测定系统研究紫甘蓝色素含量及光合特性,并与普通甘蓝'中甘11'作比较。结果表明,两个紫甘蓝品种的色素含量和净光合速率(Pn)差异不大。与普通甘蓝相比,紫甘蓝叶绿素含量较高,且含有较大比例的花青素,Pn明显降低。紫甘蓝生长过程中以结球初期Pn最高,后期Pn降低幅度明显小于普通甘蓝,结球中期叶绿素含量最高,花青素含量随着生育期进展而逐渐升高。紫甘蓝Pn日变化呈单峰曲线型,峰值出现在10:00-11:00,其光补偿点为68.5 μmo1·m-2·s-1,饱和点为1,077.5 μmo1·m-2·s-1,CO2补偿点为70.4 μmo1·mol-1,饱和点为1,140 μmo1·mol-1,均略高于普通甘蓝。20 ℃条件下,紫甘蓝的Pn最高,其低温补偿点和高温补偿点分别为-4.4 ℃和51.3 ℃,均低于普通甘蓝。
通过测定秋冬季自然降温过程中菊花脚芽的叶片相对电导率(REC),结合Logistic方程计算的半致死温度(LT50)评价了8个不同花期菊花品种在不同降温时期的抗寒性,并通过生长恢复试验进行验证。结果表明,在自然降温过程中,8个菊花品种的低温半致死温度均随气温的下降而不断降低,但下降幅度因品种而异,从4.0~9.4℃不等。8个品种抗寒性由强到弱排序依次为'金陵黄鹤'>'银星'>'奥运晚霞'>'金陵之光'>'奥运锦云'>03(6)-16>03(6)-12>'奥运火炬',植株抗寒性与花期相关性不显著。11月底菊花脚芽恢复生长试验与当月半致死温度测定结果基本一致,表明半致死温度可作为菊花抗寒性评价的一个可靠指标。当温度降到-14℃时,供试品种的脚芽均不能恢复生长。
为探索菌根技术在兰科植物保育中的应用,以野生五唇兰的内生菌根真菌和五唇兰组培苗为材料,进行组培瓶苗和盆栽苗的菌根化研究。利用固体培养的菌丝体与五唇兰无菌组培苗进行共生培养,15 d后,根染色法检测结果表明,真菌能够成功侵染根,菌根化苗的移栽成活率均达到100 %(对照为63.33 %)。种植90 d后各菌株处理苗的鲜样质量增长率均高于对照,其中F29菌株处理苗的鲜样质量增长率高于对照31.3 %。在大棚栽培条件下,利用液体菌剂对盆栽苗进行菌根化培养。90 d后各菌株处理苗的成活率和鲜样质量增长率均高于对照,其中F29菌株处理比对照高出35 %,鲜样质量增长率高于对照高33.24 %。
以草莓为试材,研究不同浓度的二烷氨基乙醇羧酸酯对草莓叶片光合作用和果实品质的影响。结果表明,与对照相比,10 、20 mg·L-1的DA-6提高了叶片的Pn和Gs,同时还提高叶片叶绿素含量、Rubisco活性和叶片中可溶性蛋白含量。在处理后7-21d,20 mg·L-1的DA-6显著提高叶片的Pn、Rubisco活性和叶片中可溶性蛋白含量。在整个处理过程中,40 mg·L-1的DA-6对叶片Pn、叶绿素含量和Rubisco活性有抑制作用,但是和对照间的差异不显著。所有的DA-6处理都能提高果实的品质,其中20 mg·L-1处理显著提高了果实的品质。这表明,适当浓度的DA-6可调节草莓叶片光合能力,并最终提高果实品质和产量。
以植物根围促生细菌NK1菌株为诱导因子,对其诱导白菜抗炭疽病进行了研究。结果表明:用菌株NK1灌根处理白菜幼苗后,叶片上病斑数及病斑面积较对照明显减少(P<0.05),对炭疽病防效达68%。不同诱导方法诱抗效果呈显著性差异(P<0.05),其中以种子处理+灌根处理方法的诱导效果最好。对菌株NK1诱导持效期的研究发现,诱抗效果以菌株NK1处理白菜植株后的第5 d接种白菜炭疽病菌时最好。此外,用菌株NK1灌根法处理白菜根部后,白菜根部与叶片组织中的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性较对照都明显升高(P<0.05),表明菌株NK1能诱发白菜对炭疽病产生系统抗性。
比较了玻璃化与包埋玻璃化超低温保存怀地黄(Rehmannia glutinosa(Gaertn.) Libosch)‘85-5’带芽茎段的效果。结果表明:4 ℃低温锻炼5 d,在添加二甲基亚砜(DMSO)和乙酰胺的预培养基中预培养3 d,60 % PVS2室温装载25 min,PVS2 0 ℃脱水30 min时,玻璃化和包埋玻璃化两种保存方法均达到本试验条件下最佳结果;两种方法相比,玻璃化法的存活率和再生率均较包埋玻璃化法高,前者的存活率(88.92 %)和再生率(64.29 %)分别是后者的1.38倍和2.41倍。可见,采用超低温保存怀地黄种质资源是可行的,且玻璃化法优于包埋玻璃化法。
‘金蜜一号’是以韩国品种‘丽威’和中国台湾省品种‘新霸’自交分离后代选育的自交系组配的一代杂种。春播果实发育期31-32 d,单瓜质量4.5 kg,果型近圆,瓤色红,中心糖度11.0%,品质较好,耐储运性较好,平均产量约4.2 t·hm-2。适宜浙江省及气候相似地区早春小拱棚和露地栽培。