为了探究苹果冠层枝梢类型对光能截获效率和光合生产力的影响,以苹果短枝型品种‘礼泉短富’和长枝型品种‘丽嘎拉’为试材,利用三维数字化技术结合枝梢和叶片尺度异速生长关系建立枝梢及冠层尺度的三维虚拟植物模型,利用RATP功能结构模型结合虚拟试验系统比较枝梢类型对枝梢形态结构、光能截获效率及枝梢相对比例对冠层光能截获效率和光合生产力的影响。结果表明:枝梢尺度、三维虚拟枝梢对各类枝梢叶片数及叶面积的模拟可满足光能截获分析的要求,但枝梢尺度光能截获模拟会低估长枝梢(> 5 cm)的光能截获效率。双参数的Beta方程可准确模拟各类枝梢叶倾角分布,果台叶片属斜生叶,其他枝梢叶片属水平叶。果台副梢节间长度及平均叶倾角高于营养枝梢,使得其光能截获效率较营养枝梢高8% ~ 14%。‘礼泉短富’叶片聚集度高于‘丽嘎拉’,二者光能截获效率无差异,但后者晴天和阴天条件下的冠层净光合速率和光合量都高于前者。在枝梢数量一定的条件下,果台副梢比例的提高可改善冠层光能截获效率,并提高‘礼泉短富’冠层在阴天条件下的冠层净光合速率及光合量。综上,对单个枝梢,花芽抽生的新梢光能截获效率显著高于叶芽抽生的新梢;花芽比例提高可显著改善冠层光能截获效率,并提高短枝型品种在阴天条件下的光合生产力。
以种子败育型无核葡萄为母本,中国抗寒野生种或者欧山杂交的品种为父本,通过人工大田杂交后利用胚挽救技术和分子标记选育无核抗寒葡萄新种质。在配置的14个杂交组合中,共获得杂种1 021株,其中‘红宝石无核’ב北冰红’成苗率最高(18.13%),获得634株。以‘左优红’为父本时,‘火焰无核’适宜作母本;‘北冰红’和‘雪兰红’为父本时,‘红宝石无核’适宜作母本;‘北醇’为父本时,‘昆香无核’适宜作母本。通过无核分子标记SCF27和无核探针GSLP1初步筛选出132个无核株系。通过抗寒分子标记S241-717初步筛选出190个抗寒株系。在筛选的这些杂种后代中,同时具有无核和抗寒性状的株系59个。利用分子标记在‘红宝石无核’ב北冰红’和‘红宝石无核’ב雪兰红’杂种后代中筛选抗寒株系,低温处理后进行定量PCR分析,发现在抗寒与不抗寒株系中抗寒相关基因CBF1、COR27和ERD15表达存在差异,抗寒株系的抗寒基因表达明显。
以‘金丝小枣’花和果实为试材进行E类MADS-box基因的生物信息、表达、亚细胞定位及蛋白互作研究。3个E-type MADS-box基因分别位于SEP1/2、SEP3和SEP4进化支。与其他物种的同源序列相比,E类蛋白在进化中非常保守。3个E类基因在枣的花和果实中均有表达,ZjSEP1/2在花不同发育时期表达比较稳定,ZjSEP3和ZjSEP4在花发育前期高表达,在感染枣疯病的花变叶中3个基因的表达均显著受抑制。3个蛋白均定位于细胞核。酵母单杂交结果表明ZjSEP1/2和ZjSEP3具有转录激活活性,可以作为转录因子调控下游基因,而ZjSEP4不具有此活性。酵母双杂交结果表明3个E类MADS蛋白都可以和A类、C/D类蛋白发生互作,ZjSEP4与ZjSEP1/2均可与自身互作,但ZjSEP3自身不发生互作。综上,3个E类MADS基因在枣花发育中具有重要作用,但功能和调控模式不同,ZjSEP3不能形成同源二聚体,ZjSEP1/2、ZjSEP4均可形成同源二聚体,3个E类蛋白均可与A、C/D类蛋白形成异源二聚体。
以来源于同一株酸枣实生苗的茎段、叶片、子叶和胚轴等组织为外植体试材,筛选到适合子叶、胚轴和叶片诱导愈伤组织的培养基为MS + 1.0 mg · L-1 2,4-D + 0.4 mg · L-1 TDZ;利用农杆菌介导法,当浸染液浓度OD600为0.6 ~ 0.8、浸染时间为30 min时,酸枣叶片、子叶、胚轴和茎段愈伤组织遗传转化率分别为31.8%、25.6%、24.5%和23.8%。利用叶片诱导的愈伤组织转化体系,获得了调控分枝发育关键因子ZjBRC1融合表达嵌合抑制子SRDX和35S::GFP空载体对照的转基因愈伤组织。荧光定量qRT-PCR分析显示,与35S::GFP转基因愈伤组织相比,ZjBRC1-SRDX下调生长素合成基因ZjYUCCA7/10-3/10-4的表达,而上调ZjYUCCA2/4/6表达。综上,本研究中建立和优化了枣愈伤组织诱导和转化体系。
从石榴基因组中鉴定出18个编码689 ~ 837个氨基酸的HAK/KUP/KT家族基因;启动子区含有多个与逆境胁迫相关的调控元件,编码蛋白中均含有一段K+转运结构域(GVVYGDLGTSPLY);系统进化分析表明,石榴、拟南芥、葡萄和梨的HAK/KUP/KT家族基因均可分为4个簇(Ⅰ ~ Ⅳ)。RNA-seq分析发现簇Ⅱ和簇Ⅲ的多数基因在石榴不同组织中均有表达,簇Ⅰ中PgrHAK5仅在根中特异性表达。qRT-PCR分析发现,PgrHAK5在石榴根中有特异性高表达,其表达受缺钾胁迫的诱导。亚细胞定位表明PgrHAK5定位于细胞质膜上。酵母功能互补试验表明,PgrHAK5具有转运K+的功能,推测定位于质膜上的PgrHAK5参与石榴根系K+的跨质膜转运。
已证实猕猴桃花粉是溃疡病远距离传播的主要途径之一。研究60Co-γ辐照、臭氧、紫外、微波、梯度水浴(35、50、80、100 ℃)等5种物理灭菌方法,ClO2、乙蒜素、四霉素、春雷霉素、氧化亚铜、代森铵、中生菌素和纳米银等8种化学药剂杀菌方法,对猕猴桃花粉溃疡病菌杀灭率、花粉活力、坐果率、单果质量和果实品质的影响。结果表明,紫外、微波、水浴和乙蒜素、四霉素、春雷霉素、代森铵处理的杀菌率较低,且花粉活力显著降低;60Co-γ辐照和ClO2、中生菌素、纳米银及氧化亚铜虽可保证有效的杀菌率及花粉活力,但会造成授粉后坐果率、单果质量、大小、硬度、可溶性固形物、干物质、维生素C含量、可溶性糖及可滴定酸等显著下降;642.85 mg · m-3臭氧1 h的花粉灭菌效果最佳,灭菌率达99.52%,花粉活力仅下降2.92%;坐果率、果实硬度、维生素C含量、可溶性糖、可滴定酸、果实单果质量、大小、干物质及可溶性固形物变化不大。结合成本、可操作性及环保等多因素考虑,臭氧处理是其中最有效且安全的猕猴桃花粉灭菌方法。
选取3份长豇豆种质资源进行全基因组重测序,利用重测序数据挖掘InDel位点,根据这些位点开发分子标记,并验证这些标记的有效性和应用价值。经过严格筛选,获得981个易于凝胶电泳检测的长度大于30 bp且多态性高的InDel位点,挑选其中在基因组上均匀分布的165个设计引物并进行验证。用6份长豇豆材料对165对引物进行初筛,其中162对可获得PCR扩增产物,共扩增出673条条带;85对引物表现出多态性,多态性带333条(占总带数的49.48%)。利用85个多态性高的标记对173份长豇豆资源进行基因分型和遗传多样性分析,共检测到333个等位位点;多态性信息含量(PIC)为0.01 ~ 0.37,平均值为0.29;基因多样性指数变异范围为0.01 ~ 0.50,平均值为0.36,表明现有长豇豆资源遗传背景相对狭窄。通过聚类分析,173份长豇豆被分为2个类群,成功将不同类型长豇豆划分到不同亚群。另外,选用亲本间多态性标记用于6个杂交组合的F1代真实性鉴定,鉴定出5个真实杂交种。本研究所开发的多态性 InDel 标记在长豇豆遗传多样性分析、杂交种纯度鉴定、遗传连锁图谱构建、基因定位和分子标记辅助选择育种等方面具有很好的应用前景。
利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)U6 RNA保守序列从茄子(Solanum melongena L.)基因组中鉴定到7个U6 RNA,并采用PCR技术成功克隆其启动子序列。GUS染色结果表明4个茄子U6启动子(SmU6-1P、SmU6-2P、SmU6-4P和SmU6-7P)具有转录活性。构建以SmU6-1P/AtU6-P驱动SmWRKY4 sgRNA的CRISPR/Cas9基因编辑载体,通过农杆菌介导侵染茄子子叶外植体得到T0代植株。以T0代植株的DNA为模板扩增WRKY4片段并对产物测序,测序结果显示以SmU6-1P构建的CRISPR/Cas9载体能靶向编辑SmWRKY4,编辑率为27.0%。在基于AtU6-P的T0代植株中未检测到碱基突变,表明在茄子遗传转化中,茄子SmU6启动子编辑效率高于拟南芥AtU6启动子。
对香菇子实体发育过程中不同阶段及组织(菌盖和菌柄)进行转录组测序,分析了差异表达基因、基因表达趋势、基因共表达网络及差异可变剪接事件。分析结果表明:在转色菌丝体阶段,大量碳水化合物代谢相关基因上调表达;此外,光受体等信号转导相关基因以及黑色素合成相关基因也上调表达,其可能参与到菌丝转色过程。原基形成过程可能涉及与环境因子感知、核糖体合成、真菌细胞壁重塑、蛋白质降解和染色质修饰等相关基因。与DNA复制和蛋白质降解相关的基因可能在菌盖发育过程中发挥重要作用,而糖苷水解酶基因可能在开伞过程中发挥作用。碳酸酐酶、几丁质酶、GH55家族蛋白和细胞色素P450编码基因可能在菌柄伸长过程中发挥作用。
从野菊(Chrysanthemum indicum)中克隆了cin-miR396a前体序列及其启动子,对前体序列进行比对与进化分析,对启动子顺式作用元件进行分析,并研究了cin-miR396a前体序列对拟南芥的遗传转化及对其耐盐性的影响。结果表明,cin-MIR396a长度为145 bp,含有完整的茎环结构,与拟南芥ath-MIR396a进化关系最近。启动子区具有光信号、茉莉酸甲酯、赤霉素、水杨酸、脱落酸等多种响应元件,推测cin-MIR396a参与多种逆境胁迫下的应答及调控。在拟南芥中过表达cin-miR396a前体可以提高盐胁迫下种子发芽率以及成苗期的耐盐性,cin-miR396a在拟南芥响应盐胁迫中发挥正调控作用。
基于传统菊花(Chrysanthemum × morifolium Ramat.)品种‘金背大红’转录组数据和菊花脑(C. nankingense)的基因组数据,通过生物信息学方法鉴定了二者的DNA甲基化相关酶基因,分析其编码蛋白结构域并构建系统发育树,还分析了基因的表达情况。从‘金背大红’中鉴定出了13个DNA甲基转移酶基因和11个去甲基化酶基因,从菊花脑中鉴定出10个DNA甲基转移酶基因和5个去甲基化酶基因。MET1同源氨基酸序列系统进化分析结果表明,菊花‘紫精灵’‘金背大红’和‘禾城星火’与甘菊[C. lavandulifolium(Fisch. ex Trautv.)Ling et Shih]处于较近的分支中,这表明他们可能有更近的演化关系,而菊花脑和菊花‘泉乡水长’与甘菊的进化关系可能较远。DNA甲基化相关酶基因在不同组织及不同菊花品种中的表达水平存在较大差异。
对文心兰(Oncidium)进行不同的光周期处理,结果发现长日照条件有利于花芽的形成;克隆获得文心兰OnGI基因,其编码区长3 483 bp,编码1 161个氨基酸;多序列比对结果显示其与石斛(Dendrobium nobile)DnGI同源性最高,为86.57%;进化树分析结果表明其与其他兰科植物为同一组。组织表达分析结果显示,OnGI在文心兰花中表达量最高,尤其在花苞形成初始时期;在不同生长时期的叶片中,花芽分化期OnGI表达量达到峰值;在不同光周期条件下,OnGI的表达模式存在差异,与拟南芥(Arabidopsis thaliana)类似。亚细胞定位显示,OnGI定位在细胞核中。在拟南芥中过表达OnGI可以提早开花。根据结果推测,文心兰和拟南芥可能存在类似的光周期调控GI表达的机制,调控植株开花。
以蛹虫草菌株W5继代培养(8 d转接1代)1 ~ 5代菌株(W5-1 ~ W5-5)为研究对象,观察蛹虫草继代培养过程中菌落形态、细胞超微结构和活性氧含量的变化,以期揭示继代培养过程中蛹虫草菌株退化的早期外部识别标志。结果表明:蛹虫草W5菌株退化是个渐变的过程,继代培养至3代菌落形态、菌丝和孢子形态开始出现变化,节律环和颜色变化以及菌丝表面的缢裂和凹陷是3代的显著外部特征,可作为蛹虫草菌株退化的早期菌落形态识别标志。在蛹虫草W5菌株继代培养过程中,菌丝的细胞壁逐渐变薄,细胞核逐渐变大,线粒体逐渐肿胀变形,液泡逐渐增大,膜边体逐渐减少,圆球体逐渐溶解,形成脂滴和嗜锇颗粒。可以通过细胞中核仁是否显现、有无膜边体、有无液泡融合和自噬现象来早期判断菌株的退化程度。从3代开始菌丝细胞NBT染色颜色逐渐加深,反映细胞活性氧含量增加。细胞H2O2含量测定表明,3代H2O2含量显著高于前2代。基于线粒体与活性氧的紧密关系,认为线粒体结构和数量上的改变可能是蛹虫草退化的重要原因之一。
以3年生尤力克柠檬实生苗为试验材料,嫁接柑橘黄脉病毒(CYVCV)现症后,测定叶片的叶绿素含量、叶绿素荧光参数、光合参数和酶活性。与健康植株相比,病株中叶绿素含量(Chl)、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、潜在光化学效率(Fv/Fo)和最大光化学效率(Fv/Fm)较对照植株显著降低,初始荧光(Fo)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量显著增高,过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性无显著变化,透射电镜观察发现其叶绿体因淀粉粒增多而肿胀变大,基质和基粒片层松散,嗜锇颗粒增多。CYVCV侵染破坏了尤力克柠檬的叶绿体结构,严重影响叶片的光合作用能力,进而引起植株生长受阻。
为揭示马铃薯与枸杞嫁接愈合过程,采用石蜡切片技术对马铃薯/枸杞嫁接植株进行解剖学观察。结果显示:马铃薯/枸杞嫁接植株生长旺盛,可完成整个生育进程。马铃薯/枸杞嫁接愈合过程可分为4个阶段:(1)隔离层产生期,嫁接5 d后,嫁接接口处产生隔离层;(2)愈伤组织形成期,嫁接9 d后,隔离层细胞脱分化,最后形成愈伤组织;(3)愈伤组织分化期,嫁接13 d后,愈伤组织分化,形成愈伤组织桥;(4)新的维管组织形成期,嫁接17 d后,形成新的韧皮部和木质部及维管束桥,使砧木和接穗完全结合,愈合过程结束。
采用田间试验研究不同密度下东西向栽培对温室番茄生长、产量、品质的影响,以期为设施蔬菜轻简、优质、高效生产提供技术支持。试验采用适合温室机械化作业的东西向起垄种植番茄,设密度和不同位置2个因素,主因素为普通稀植(3.3万株 · hm-2,留4穗果)和矮化密植(6.6万株 · hm-2,留3穗果),副因素为4个不同位置的种植畦处理。结果表明,温室内环境条件在不同位置上存在明显差异,北畦土壤温度较南畦高0.3 ~ 1.3 ℃,但光照强度较南畦降低39.7% ~ 49.0%;不同位置土壤水分和EC值的变幅较小。矮化密植处理南畦幼苗茎粗较北畦显著增加。番茄产量南畦高于北畦,增产12.8% ~ 30.1%,密植处理显著高于稀植处理,增产27.7%。与稀植相比,密植没有降低果实品质。在时间上,密植处理早期(6月9—20日)番茄产量比稀植处理增产37%,早期产量增产贡献率达到73%,显著提高了番茄生产的经济效益。综上,温室番茄东西向栽培条件下,采用密植有利于合理利用环境条件,提高早期产量实现增产增收。
一年生辣椒中极度缺乏抗尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)的育种材料,亟需开展抗炭疽病辣椒资源的发掘。采用室内果实离体接种结合田间病圃,对74份引自美国、西班牙等的辣椒种质进行了对尖孢炭疽菌的抗性鉴定。结果表明:40008和30163经室内针刺接种后的发病率分别为4.37%和1.08%,病圃鉴定的病情指数为5.49和9.07,表现为高抗;11242和PI201234室内针刺接种后的发病率为8.63%和9.86%,病圃鉴定的病情指数为18.93和22.34,表现为抗病;10022和10062等17份种质表现为中抗;其余50份种质表现为感病。40008和30163均属晚熟类型,果实小,单株结果数少,可通过回交转育、花药培养及分子生物学技术改良后利用。这2份高抗种质的挖掘,可为抗炭疽病新品种的选育、QTL定位及分子标记的开发等奠定材料基础。
韭菜根腐病是设施连作多年生韭菜的重要病害之一。为明确辽宁省设施韭菜根腐病的病原菌种类,从韭菜感病根系分离纯化获得45株镰孢菌,结合形态学特征及EF-1a、Histone3、IGS基因片段序列分析结果,鉴定为尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、层出镰孢菌(F. proliferatum)和腐皮镰孢菌(F. solani)。经柯赫氏法则证病,确定均可引起韭菜根腐病。对病原菌的生物学特性研究结果表明,3种镰孢菌最适生长温度为30 ℃左右;最适pH 7 ~ 8;黑暗条件有利于病原菌菌丝生长;菌丝的致死温度为75 ℃10 min,分生孢子致死温度为56 ℃10 min。病原菌对碳源鼠李糖以及氮源硝酸钠、甘氨酸利用率最高。综上,尖孢镰孢菌、层出镰孢菌和腐皮镰孢菌是辽宁省设施韭菜根腐病的主要病原菌,其中尖孢镰孢菌分布最广,致病力最强,属于优势致病菌。
概述了光照对番茄红素生物合成调控的研究进展,探究光照在基因转录、转录后、光胁迫、光合产物等层面对番茄红素生物合成的辅助调控机制。结论表明:红光/远红光对PSY基因转录调控是主要方式之一,红光/远红光、蓝光及紫外光信号转导中存在交叉联系,HY5、PIF及COP1等光响应因子同时参与多种不同光质的信号转导过程。红光/远红光对PSY酶活性和番茄红素生物合成底物葡萄糖的调控,番茄红素对光胁迫下的抗胁迫响应,是番茄红素生物合成的辅助调控方式。
蜡梅(Chimonanthus praecox)花的整体颜色主要由中被片决定,总体上较为单调。总结了蜡梅花色表型及品种分类、花色成分及合成途径、花色呈色分子机制及关键基因等研究成果,并对新资源类型红花蜡梅的选育与性状及变色过程等进行了综述。
鲜食枣新品种‘浙鲜枣1号’是由‘义乌大枣’中发现的优株选育而来。在浙江义乌地区果实脆熟期为9月5日左右。平均单果质量13.3 g,果实可食率96.99%。果肉白色,质地脆,肉质细,汁液多,有蜂蜜味,总糖含量10.93%,可滴定酸含量4.4 g · kg-1,维生素C含量平均2.69 mg · g-1。品质优良,适宜于浙江省及类似气候地区栽培。
珍珠苦瓜新品种‘美玉二号’是以雌性较强的中早熟自交系CP92-7为母本,中迟熟优质油瓜自交系M1107-B为父本杂交选育而成。第1雌花节位18.6 ~ 18.9节,第1个瓜坐瓜节位20.2 ~ 20.8节。瓜呈长圆锥形,果实浅绿色,油亮有光泽,圆瘤为主、间有条瘤。瓜长26.7 ~ 28.5 cm,横径6.38 ~ 6.53 cm,肉厚1.13 ~ 1.16 cm。单瓜质量397.7 ~ 427.5 g,单株产量1.66 ~ 1.89 kg,一般栽培产量约52 500 kg · hm-2。
‘皖秋葵3号’是从江苏省盐城市引进的‘盐秋葵-1’品系的变异单株中经系谱法选育成的新品种。5 ~ 6片叶时始花,春播出苗后50 d左右可采摘。果皮浅绿色,果形挺直,鲜果长12 ~ 15 cm,粗18 ~ 22 mm,果棱数5,平均单果质量14.4 g。单株蒴果数39.9个,鲜果产量30 000 ~ 35 000 kg · hm-2。早熟性好,嫩果肉厚,口感鲜美,商品性状优良,适合深加工。适应性广,适合在安徽省及周边省份推广和种植。
‘健君1号’是从福建省龙岩市武平县野生金线莲中选出的新品种。株高8.1 ~ 8.5 cm,茎直立,根状茎匍匐,节上生根;叶片卵圆形,正面暗紫红色,具金红色绢丝光泽的网脉,背面淡紫红色,叶柄基部扩大成抱茎的鞘;总状花序,具2 ~ 6朵花,花白色;结实率极低。在浙江地区组培苗种植当年不开花,种植6个月后单株鲜质量2.38 g,鲜产847.80 g · m-2,多糖含量138.00 mg · g-1。长势旺盛,抗病性强,兼具药用、食补与观赏价值。
‘南安1号’是从福建省南安市向阳乡樟树中选育出的品种。树冠广卵形,2年生树高达1.3 ~ 2.0 m,枝叶 ≥ 31.5 t · hm-2,枝叶鲜样精油得率2.6% ~ 3.6%。嫩叶呈酒红色,持续时间达15 ~ 25 d,观赏性好。花期4—5月,果期8—11月。