从‘秋蜜红’桃中克隆到1个IDD转录因子基因PpIDD11。结果显示:PpIDD11编码区全长1 575 bp,编码524个氨基酸,具有保守的ID域。烟草亚细胞定位显示PpIDD11蛋白定位于细胞核,酵母转化试验表明其具有酵母转录自激活活性。荧光定量PCR分析显示PpIDD11主要在花器官中表达,特别在雌蕊中转录水平最高。过表达PpIDD11拟南芥株系出现了柱头高于野生型、荚果变短且结实率下降的表型,同时也出现了莲座叶叶片卷曲、植株变矮的现象。转录组测序分析显示,PpIDD11转基因拟南芥株系共有上调基因3 378个,下调基因3 156个,其中包含LOX4、LOX3、GLC、E6L1等花器官发育调控基因。
为探究中国樱桃花和果实的若干性状在后代中的变异和遗传倾向,对中国樱桃‘红妃’(大果,综合性状优良)和‘蒲江红花’(半野生,小果)杂交F1代708株个体的17个花和果实的性状进行了观测和分析。在四川成都,F1群体2021年花期为2月7—17日,盛花期为2月12—14日;果实成熟期为3月30日—4月19日,集中在4月5—15日。F1代的花蕾、花瓣和果实的颜色遗传变异丰富,其中果实颜色有橙红、红、紫红和黑紫等表型。单果质量、果实纵径、横径、侧径、果形指数、果实可溶性固形物含量以及果柄长度均呈正态分布,广义遗传力为60.12% ~ 84.90%。F1代果实质量为1.60 ~ 6.37 g,呈变小趋势,变异系数为20.75%,超中亲率和超高亲率分别为28.81%和2.26%。果实可溶性固形物含量为8.38% ~ 20.53%,呈升高趋势,后代超高亲率为47.60%。果实风味总体表现为甜酸、酸甜和甜。果柄长度表现为超亲遗传的倾向,超高亲率为51.13%,更有利于果实采摘、采后储运以及观赏品种的选育。单果质量与果实纵径、横径、侧径均呈极显著正相关,与可溶性固形物含量呈极显著负相关。
为探讨miR408及靶基因DlLAC12在龙眼球形体细胞胚诱导及不同非生物胁迫下的表达模式,采用miR-RACE PCR和Tail-PCR克隆获得pri-miR408 cDNA和转录起始位点、dlo-miR408 gDNA、靶基因DlLAC12 cDNA及启动子pro-MIR408序列。研究结果显示:dlo-pri-miR408 cDNA、gDNA全长均为706 bp,5′端转录起始位点为胞嘧啶(C)。DlLAC12 cDNA全长为1 725 bp,pro-MIR408全长为1 532 bp。pro-MIR408序列上存在ABA、GA3、JA等激素信号传导顺式作用元件和响应光、低温胁迫等相关元件。qRT-PCR结果显示,dlo-miR408-3p随外源添加的蔗糖浓度、Cu2+浓度及培养温度的变化呈现动态表达;而dlo-miR408-5p1对蔗糖不敏感,在铜离子失衡和低温时下调表达。dlo-miR408-3p与DlLAC12负调控模式能响应高浓度ABA(≥ 500 μmol · L-1)处理,而不同浓度GA3处理下二者表达模式一致。dlo-miR408-3p与DlLAC12在球形胚诱导不同天数呈现负调控,说明在球形胚诱导过程发挥作用。试验表明,dlo-miR408与靶基因DlLAC12可参与龙眼体胚发生与非生物胁迫响应。
为研究R2R3-MYB转录因子调控石榴花青苷合成的机理,以石榴品系‘榴花红’(红花)和‘榴花白’(白花)为试材,利用同源克隆技术分离出1个调控花青苷生物合成的R2R3-MYB基因PgMYB111(Pg012177.1)。其CDS全长为1 101 bp,编码366个氨基酸。多重比对分析表明,PgMYB111蛋白的N端含有1个R2R3保守结构域,以及1个与bHLH蛋白互作的[D/E]Lx2[R/K]x3Lx6Lx3R结合位点。系统发育树分析表明,PgMYB111与苹果和扁桃具有较高的同源性,聚为一簇。亚细胞定位试验发现,PgMYB111定位于细胞核。PgMYB111在‘榴花红’中的表达量是‘榴花白’的4.3倍,且‘榴花红’花瓣花青苷含量也显著高于‘榴花白’。烟草瞬时表达结果表明转基因烟草叶片的花青苷含量和基因表达量呈先上升后下降的趋势,均在第5天达到最高,分别是未侵染叶片的3.8倍和8.9倍,pBI121空载叶片的3.17倍和5.57倍。结果表明PgMYB111参与了花青苷合成途径并促进其合成。
以茄子(Solanum melongena)‘S12’为试验材料,同源克隆了生长素响应因子(auxin response factor ARF5)基因SmARF5,该基因开放阅读框全长2 793 bp,编码930个氨基酸,定位于细胞核。分别构建载体pGBKT7-SmARF5-Full和截短体pGBKT7-SmARF5-674aa进行酵母转化试验。结果表明,SmARF5具有转录激活活性,SmARF5全长可以与SmIAA16和SmIAA26蛋白互作,截短体SmARF5-674aa不与SmIAA16和SmIAA26互作。构建过表达载体pCAMBIA-2301G-SmARF5并转化入烟草。结果表明,与野生型相比,SmARF5转基因烟草植株出现明显分枝,茎粗增大。以上结果表明SmARF5可能通过生长素信号转导途径在植物分枝形成过程中发挥重要作用。
芹菜种子小,且含有大量的萌发抑制物质,给其种苗繁育带来困难。采用培养皿培养和穴盘培养两种方式,用不同浓度(0、5%、10%、20%、40%)NaClO处理‘六合黄心芹’和‘赛雪’芹菜种子,对种子萌发指标、幼苗生长指标及光合参数进行测定,并分析幼苗中叶绿素含量变化以及相关基因表达。结果表明:5%次氯酸钠溶液处理芹菜种子,其发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数最高,幼苗生长势最强,幼苗的壮苗指标、叶绿素含量以及净光合速率也有一定程度提高,相关基因的相对表达量也较高。这些结果说明次氯酸钠处理促进芹菜种子的适宜浓度为5%。
为探索交替氧化酶(Alternative oxidase,aox)基因在大型真菌高温胁迫响应中的功能,以糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)CCMSSC00389菌株为出发菌株,克隆得到1个aox基因,其gDNA全长1 845 bp,cDNA全长1 152 bp,编码383个氨基酸,具2个跨膜螺旋区,蛋白分子量43.53 kD。以野生型和aox转化菌株为材料,验证了aox在高温胁迫下的功能及调控通路。结果表明,32 ℃高温胁迫下,菌丝生长速率下降了42.27%。aox基因转录水平的升高可能通过介导逆行信号通路影响抗氧化酶基因的表达,从而促进活性氧的清除,提高高温胁迫下菌丝生长速率,揭示aox在提高糙皮侧耳菌丝高温耐受性方面发挥正调控作用。
以红色的郁金香品种‘纯火’为材料,采用高效液相色谱技术对其4个花期的花青素苷含量进行了测定,结果表明,随着花朵的发育,花青素苷的含量逐渐升高,在盛开期含量最高,达3 002.75 μg · g-1 FW。从花中克隆出结构基因TgANS,GenBank登录号为MZ442383,开放阅读框长1 071 bp,编码356个氨基酸,TgANS基因表达水平在不同花期存在显著差异,随着花发育逐渐升高,表达趋势与花青素苷的积累趋势基本一致。将TgANS导入烟草进行异源表达,转基因株系花色明显变红,TgANS表达量显著增加,花青素苷含量增加,进一步对这些株系内源的NtCHS、NtCHI、NtFLS、NtF3H、NtF3’H和NtDFR表达进行分析,NtF3H、NtF3’H和NtDFR表达量显著上升,NtCHS和NtCHI表达量下降。表明郁金香TgANS参与了花青素苷的合成。
以月季‘月月粉’(Rosa chinensis‘Old Blush’)扦插苗为试验材料,基于干旱胁迫的转录组克隆得到响应干旱胁迫的AP2/ERF类转录因子基因RcDREB2A,对其进行生物信息分析、表达分析以及转录因子特性分析。结果表明,RcDREB2A包含1 155 bp的开放阅读框,编码384个氨基酸,在75 ~ 142位氨基酸区域含有1个保守的AP2结构域;系统进化树分析表明RcDREB2A与野草莓(Fragaria vesca)FvDREB2A(XP_004307690.1)亲缘性最高;RcDREB2A蛋白预测分子量为5 737,理论等电点为4.75,无跨膜结构域,不含信号肽;定位于细胞核,没有转录激活活性;RcDREB2A在月季‘月月粉’叶片中表达量较高,且能被ABA、干旱、低温、盐胁迫处理诱导表达上调。以上结果表明,RcDREB2A可能参与月季多种非生物胁迫的响应。
以月季红色花品种‘卡罗拉’(Rosa hybrida‘Carola’)为材料,从其花瓣cDNA 中克隆到1个R2R3-MYB 基因,命名为RhMYB113c。其开放阅读框为699 bp,编码233个氨基酸。蛋白多重序列比对分析发现RhMYB113c含有R2和R3结构域。系统进化树分析表明,RhMYB113c与花青素苷合成激活因子AtMYB114、AtMYB113、AtMYB75、AtMYB90亲缘关系最近。组织特异性表达检测发现,RhMYB113c主要在‘卡罗拉’花瓣和花柱中表达,在白色花品种‘白缎’所有组织中均不表达。不同花发育时期的基因表达显示,RhMYB113c在‘卡罗拉’未着色花瓣中不表达,在盛花期花瓣中高表达,而在白色品种的每个时期均不表达。酵母双杂交和烟草瞬时表达试验证实RhMYB113c调控花青素苷的合成,从而影响月季红色花瓣着色。
茶树具有较强的富硒能力,但其吸收硒的生理特性仍不明确。以‘中茶108’茶树品种为研究对象,探究pH、培养时间、硒浓度以及能量代谢、水通道蛋白、离子通道抑制剂对茶树根系摄取硒酸盐和亚硒酸盐的影响。pH试验结果表明,茶树根系对亚硒酸盐的吸收速率随着pH升高而降低,在pH 3.0时最高,在pH 4.0 ~ 7.0间保持稳定。不同处理时间试验表明,茶树根系对亚硒酸盐和硒酸盐的摄取均存在累积效应,根系总硒含量在亚硒酸盐处理下随培养时间的增加而显著递增,在硒酸盐处理下随培养时间的增加呈现先上升后降低的趋势。不同硒浓度的试验表明,茶树根系对硒酸盐和亚硒酸盐的吸收速率与硒浓度之间存在线性正相关,且对亚硒酸盐的吸收速率显著高于硒酸盐。为明确茶树根系吸收硒酸盐和亚硒酸盐的途径,在pH 5.0,硒浓度5 μmol · L-1培养条件下进行抑制剂添加试验。结果表明,能量代谢抑制剂CCCP和DNP,以及水通道蛋白抑制剂AgNO3均能显著抑制茶树根系对硒酸盐和亚硒酸盐的吸收,说明硒酸盐和亚硒酸盐进入茶树体内依赖于能量代谢参与的主动运输以及水通道蛋白运输。阴离子通道抑制剂NPPB显著抑制茶树根系对亚硒酸盐的吸收,但并不影响对硒酸盐的吸收,表明阴离子通道也是亚硒酸盐进入茶树体内的途径之一。
新疆野苹果(Malus sieversii)被认为是现代栽培苹果的祖先物种。为有效保护苹果遗传资源,揭示新疆野苹果和栽培苹果叶绿体基因组的差异,验证现代栽培苹果是否起源于新疆野苹果。对新疆野苹果和栽培苹果‘元帅’和‘金冠’的叶绿体全基因组进行了测序、组装和注释,获得了其叶绿体基因组物理图谱,并进行了比较基因组分析和系统发育分析。结果表明,新疆野苹果和两个栽培苹果品种的叶绿体基因组均为四段式结构,其基因组总长度在160 068 ~ 160 288 bp之间;共注释出131个基因,其中蛋白编码基因86个,tRNA基因37个,rRNA基因8个;新疆野苹果与栽培苹果的碱基组成也基本相似,AT/GC含量基本相同;新疆野苹果鉴定出43个重复序列和64个简单重复序列位点,栽培品种‘元帅’鉴定出49个重复序列和61个简单重复序列位点,‘金冠’鉴定出43个重复序列和57个简单重复序列位点。系统发育分析结果表明:基于全序列构建的贝叶斯进化树在各个节点具有很高的支持率,苹果属的所有物种形成一个单系群(支持率100%),新疆野苹果和两个栽培苹果品种聚在一起,形成一个小分支(支持率100%),且新疆野苹果位于该小分支的基部,验证了新疆野苹果是栽培苹果的祖先物种的推断。
香蕉杂交品种‘粉杂1号’是当前商业种植中唯一的抗香蕉枯萎病粉蕉(Musa spp. ABB,Pisang awak)品种,该品种来源于高感病的‘广粉1号’(ABB)偶然得到的种子实生苗,其基因组组成和父本未知。通过流式细胞技术(FCM)、染色体制片、基于ITS的限制性片段长度多态性聚合酶链反应(ITS-PCR-RFLP)及反转录转座子间扩增多态性(copia-IRAP)分子标记技术,并结合形态性状评分对‘粉杂1号’基因组组成进行鉴定。流式细胞分析结果显示‘粉杂1号’为四倍体,染色体制片显示染色体数为2n = 4x = 44条,ITS-PCR-RFLP分子标记结果显示其同时具有A和B基因组,copia-IRAP结果显示其含两套或者以上B基因组;形态打分为67分,对应基因组组成为ABBB。综合以上结果认为‘粉杂1号’基因组组成为ABBB,推测其父本可能为BB基因组组成的野生蕉。
利用三维激光扫描测量臂测量果实表面积的新方法,以标准块和乒乓球为对照,精确测定了梨(Pyrus)、苹果(Malus × domestica)、橙(Citrus)、枣(Ziziphus jujuba)、番茄(Solanum lycopersicum)、香蕉(Musa nana)和葫芦(Lagenaria siceraria)7种果实的表面积。与传统公式法相比较,该方法速度快、效率高、稳定性强,适宜应用于园艺作物果实表面积的精确测量。
为明确引起四川彭州莴笋病毒病的病毒种类,通过生物接种和电子显微镜方法,结合小RNA测序技术和反转录PCR对采集病样进行鉴定和分析。摩擦接种试验表明回接莴笋的发病症状与田间相似,矮牵牛叶片出现局部枯斑;利用电镜可观察到叶肉细胞中有大量病毒粒体聚集于内质网池,其形态特征与正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)病毒相似;通过小RNA测序技术获得了番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt orthotospovirus,TSWV)接近全长的序列,表明侵染该批次莴笋样品的病原物可能是TSWV。利用RT-PCR方法确定田间和回接莴笋及枯斑寄主中均存在TSWV,进一步证明四川彭州莴笋病毒病是由TSWV侵染引起的,这是四川首次发现TSWV为害莴笋。对拼接序列和N基因序列分别构建系统发育树可知,彭州分离物TSWV-SCPZ分别与韩国分离物(YY和K)和美国分离物(MR-01)亲缘关系最近。
从收集保存的种质资源中,选取466份甜瓜进行果实的8个质量性状和11个数量性状(17个指标)的遗传多样性分析,采用精密色差仪进行果皮底色、外果肉和内果肉颜色L、a和b值的测定,以期实现果实颜色的定量分析。结果表明3个质量性状和11个数量性状(17个指标)的多样性指数均大于1,表明所选的466份材料具有较高的遗传多样性;把甜瓜果实颜色用Lab值数字化衡量并通过Lab值进行颜色分类,克服了颜色描述不精准的弊端,实现了颜色的定量分析,为甜瓜育种果实颜色数字化描述奠定基础。
综述了果蔬采后品质和生理失调与其木质素积累的关系,以及木质素单体的生物合成,木质素聚合和转录调控的研究进展,介绍了不同采后处理技术对果蔬品质的影响。
本文介绍了中国绣球属植物资源的分类与亲缘关系研究进展,总结了绣球属野生资源分布情况,梳理了绣球属植物品种选育及市场应用现状,分析了绣球属植物在栽培应用方面已取得的进展及存在的问题,提出了未来中国绣球属种质资源相关研究工作的重点,以期为中国绣球属种质资源的创新与利用提供参考。
‘美玉’是从‘金二十世纪’ב金花4号’的杂交后代中选育出的中早熟梨新品种。树势中庸,树姿直立,萌芽力、成枝力强。果实扁圆形,平均单果质量252 g;果皮绿黄色,皮薄,果柄短;果肉乳白色,松脆多汁,风味甘甜,品质上乘。可溶性固形物含量12.5% ~ 14.3%,可滴定酸含量0.2%,果实硬度5.7 kg · cm-2。在石家庄地区8月上旬成熟,果实生育期137 ~ 142 d,盛果期产量可达 45 111.4 kg · hm-2。
‘粤彤’是由‘无刺卡因’和‘土种’通过人工杂交选育的菠萝新品种。植株叶片绿色,叶缘无刺,叶尖柔软,叶背面有多条白色蜡粉条带。果实圆筒形,成熟时果皮紫红色,果肉黄橙色略偏紫红,肉质清甜、多汁,纤维略粗,适合于鲜食与加工。综合性状表现优良,丰产稳产,58 ~ 72 t · hm-2。
‘桂金凤’为中果型早熟有籽西瓜新品种。植株生长势强,抗逆性强,易坐果。果实长椭圆形,单果质量2.5 ~ 4.0 kg;果皮金黄色,皮厚0.6 ~ 1.0 cm,皮质硬,不易裂;果肉红色,肉质酥脆,清甜爽口,中心可溶性固形物含量12.0%。全生育期春茬80 ~ 100 d,夏秋茬60 ~ 85 d,果实发育期25 ~ 30 d。在广西地区适宜露地与大棚种植。
蟹爪兰‘缤纷十月’是从以‘超级肯尼亚’为母本,‘丹麦’为父本的杂交后代中选育出的新品种。花期早,茎节较大,茎节具有光泽,花为亮丽的橙红色,观赏性佳。生长势强,抗病能力强,耐高温性和耐寒性较好。
‘变早素’是从蜡梅实生苗中选育出的新品种。花期早,花大色艳,盘碟型,金黄色,着花繁密,香味浓郁,抗性强,内被片顶缘紫纹常形成一个紫色圆环,新奇美观,观赏价值高。适宜做切花、盆栽、盆景和绿化苗木。