辣椒N 基因介导抗根结线虫作用早期表达基因的抑制性消减杂交SSH分析

园艺学报 ›› 2007, Vol. 34 ›› Issue (3): 629-636.

辣椒N 基因介导抗根结线虫作用早期表达基因的抑制性消减杂交SSH分析

茆振川^1,2 ;谢丙炎^2*
; 杨宇红² , 冯东昕² ;冯兰香²; 杨之为¹

(¹ 西北农林科技大学植物保护学院, 陕西杨凌712100; ² 中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京100081)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-06-25 发布日期:2007-06-25

Analysis of Early Expression Genes Resistance to Root Knot Nema tode in NGene Pepper by SSH

MAO Zhen-chuan^1,² ; XIE Bing-yan^2*
;YANG Yu-hong²; FENG Dong-xin² ;FENG Lan-xiang² ;
YANG Zhi-wei¹

(¹ College of Plant Protection, N orthwest A & F University, Yangling, Shaanxi 712100, China; ² Institute of Vegetables andFlowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, B eijing 100081,China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2007-06-25 Published:2007-06-25

摘要/Abstract

摘要： 以含N 基因的辣椒(Capsicum annuum L. ) 为试验材料, 接种南方根结线虫(Meloidogyne in
cognita) 12、24、36 h的根尖材料作为测验方( tester) , 相应的未接种根尖材料作为驱动方( driver) , 构
建一个南方根结线虫诱导N 基因表达早期的正向抑制消减杂交cDNA文库, 并结合文库高密度点阵膜杂交
差异筛选, 获得了237条表达序列标签( EST) 。在GenBank上进行BLASTn与BLASTx分析, 得到148条
功能已知的EST序列, 获得已知的上调抗性相关EST 68个。分离出了具有NBS2LRR结构的抗线虫蛋白和
类LRR抗性蛋白的基因, 防御作用相关的类萌芽素(GLP) 、HSR203J 蛋白、蜜腺蛋白、蛇毒素肽等基因,
抗性相关的WRKY、ERFBP等转录因子基因, 以及G蛋白、142323蛋白等多种信号蛋白基因。通过Gene
Ontology分析, N 基因介导的早期表达抗病基因涉及病原物的识别、抗性信号传导、过敏性坏死、系统获得
性抗性以及植物细胞保护机制等多个方面, 并有许多功能未知的基因有待于进一步的研究。

关键词: 根结线虫, 辣椒, N 基因, 抑制性消减杂交, 抗线虫相关基因

Abstract: The nematode resistant gene N is a single dominant gene in pepper cultivar CarolinaWonder
(Capsicum annuum L. ). To investigate the early up2regulated exp ression genes p rofile in cultivar Carolina
Wonder induced by root2knot nematode (Meloidogyne incognita, RKN) , a forward subtracted cDNA library
was constructed using supp ression subtractive hybridization ( SSH). The cDNA of pepper seedling root tip s in
oculated with J2 RKN for 12, 24 and 36 h were used as tester and that from untreated root tip s as driver. To
tally 237 RKN2induced SSH cDNA fragments were selected with DIG Nonradioactive Nucleic Acid Labeling
and Detection System. Based on the sequencing and BLAST analyzing of 148 fragments, 68 up2regulated ex
p ression EST fragmentswere identified, including the genes encode nucleotide2binding site / leucine-rich repeat
(NBS2LRR) disease resistant p roteins and LRR resistance p rotein2like; some defense p roteins, such as Germ
in2like p rotein, HSR203J p rotein2like, Nectarin, and Snakin22; some biostress resistance related transcrip tion
factor likeWRKY and ERFBP; some signal p roteins, such as GRP2like p rotein and 142323 family p rotein.
The Gene Ontology analysis revealed that the up2regulated ESTs involved in the recognition to nematode, sig
nal transduction, p rotection mechanism, HR and SAR. In addition, some ESTs of unknown function may benovel genes.

Key words: Root-knot nematode, Pepper, N gene, Suppression subtractive hybridization ( SSH ), Resistant-nematode gene

茆振川;;谢丙炎;杨宇红;冯东昕;冯兰香;杨之为. 辣椒N 基因介导抗根结线虫作用早期表达基因的抑制性消减杂交SSH分析[J]. 园艺学报, 2007, 34(3): 629-636.

MAO Zhen-chuan;;XIE Bing-yan;YANG Yu-hong;FENG Dong-xin;FENG Lan-xiang;YANG Zhi-wei. Analysis of Early Expression Genes Resistance to Root Knot Nema tode in NGene Pepper by SSH[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2007, 34(3): 629-636.

[1]	罗海林, 袁雷, 翁华, 闫佳会, 郭青云, 王文清, 马新明. 蚕豆萎蔫病毒2号青海辣椒分离物的鉴定与全基因组序列克隆[J]. 园艺学报, 2023, 50(1): 161-169.
[2]	曹亚从, 张正海, 于海龙, 冯锡刚, 张宝玺, 王立浩. 螺丝椒新品种‘中椒409号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 111-112.
[3]	曹亚从, 张正海, 于海龙, 冯锡刚, 张宝玺, 王立浩. 螺丝椒抗病新品种‘中椒209号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 113-114.
[4]	王永平, 胡明文, 朱文超, 廖芳芳, 白立伟, 高刚. 辣椒新品种‘红辣3号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 115-116.
[5]	刘术均, 惠成章, 赵丽丽, 孙永生, 刘爱群. 中早熟辣椒新品种‘美罗卡’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 117-118.
[6]	王飞, 李宁, 尹延旭, 高升华, 徐凯, 姚明华. 辣椒新品种‘鄂椒红元帅’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 119-120.
[7]	李宁, 尹延旭, 高升华, 徐凯, 王飞, 姚明华. 辣椒新品种‘锦绣红117’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 121-122.
[8]	方荣, 陈学军, 周坤华, 袁欣捷, 雷刚, 黄月琴. 辣椒新品种‘赣椒18号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S1): 75-76.
[9]	董桑婕, 葛诗蓓, 李岚, 贺丽群, 范飞军, 齐振宇, 喻景权, 周艳虹. 不同光质补光对辣椒幼苗生长、丛枝菌根共生和磷吸收的影响[J]. 园艺学报, 2022, 49(8): 1699-1712.
[10]	李颖, 王恒明, 徐小万, 徐晓美, 黄智文. 辣椒新品种‘粤椒8号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(8): 1837-1838.
[11]	李平平, 张祥, 刘雨婷, 谢志和, 张芮豪, 赵凯, 吕俊恒, 王梓然, 文锦芬, 邹学校, 邓明华. 辣椒63份种质果皮颜色与呈色物质的关系[J]. 园艺学报, 2022, 49(7): 1589-1601.
[12]	邹学校, 朱凡. 辣椒的起源、进化与栽培历史[J]. 园艺学报, 2022, 49(6): 1371-1381.
[13]	傅鸿妃, 聂智星, 陈建瑛. 辣椒新品种‘杭椒12’[J]. 园艺学报, 2022, 49(6): 1395-1396.
[14]	龚明霞, 赵虎, 王萌, 吴星, 赵曾菁, 何志, 黄金梅, 孟生德, 王日升. 广西辣椒病毒的sRNA深度测序和RT-PCR鉴定[J]. 园艺学报, 2022, 49(5): 1060-1072.
[15]	张世才, 李怡斐, 王春萍, 杨小苗, 黄启中, 黄任中. 辣椒种质尖孢炭疽菌抗性鉴定与评价[J]. 园艺学报, 2022, 49(4): 885-892.