桃叶片β- 半乳糖苷酶基因全长cDNA克隆及原核表达

园艺学报 ›› 2006, Vol. 33 ›› Issue (4): 721-724.

桃叶片β- 半乳糖苷酶基因全长cDNA克隆及原核表达

卞伟华^{1, 4};江昌俊^2*;王朝霞³

(¹安徽农业大学茶叶生物化学与生物技术重点实验室, 安徽合肥230036; ²安徽农业大学生物技术中心, 安徽合肥230036; ³安徽教育学院生物系, 安徽合肥230061; ⁴山东滨州医学院生化教研室, 山东滨州256603)

收稿日期:2005-06-18 修回日期:2005-10-11 出版日期:2006-08-25 发布日期:2006-08-25

Cloning and Expression of β-galactosidase Gene cDNA in Peach

Bian Weihua^{1, 4};Jiang Changjun2*;Wang Zhaoxia³

( ¹ Key Laboratory of Tea Biochemistry & Biotechnology, Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036, China;²Biotechnology Center, Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036, China; ³Department of Biology, Anhui Institute of education, Hefei, Anhui 230061, China; ⁴Department of Biochemistry, Binzhou Medical College, Binzhou, Shandong 256603, China)

Received:2005-06-18 Revised:2005-10-11 Online:2006-08-25 Published:2006-08-25

摘要/Abstract

摘要： 利用RT-PCR和RACE技术, 从蟠桃(Amygdalus persica var. compressa Bean) 中克隆出3 285 bp的β - 半乳糖苷酶基因cDNA全长, GenBank登录号为AY874412。该cDNA 2 559 bp, 编码853个氨基酸。将其插入到大肠杆菌表达载体pET-32a ( + ) 中, 转化BL21 trxB (DE3) , 筛选重组菌株。经IPTG诱导表达后, SDS-PAGE呈现约115 kDa特异表达条带。并通过体外酶促反应分析表达的融合蛋白的生物活性。

关键词: 桃, β - 半乳糖苷酶, cDNA末端快速扩增, cDNA克隆, 原核表达

Abstract: A 3 285 bp cDNA encoding β-galactosidase was cloned from compress peach by the methods of RT-PCR and rapid amplification of cDNA ends (RACE). The accession number is AY874412, which contains 2 559 bp, encoding a 853 residue polypeptide. The cDNA was constructed into the vector pET-32a( + ) designed for recombinant strain. After IPTG induction, it was observed there was a special band about 115 kDa on SDS-PAGE. The activity of the fusion protein was analyzed by in vitro enzymatic reaction.

Key words: Peach, β-galactosidase, Rapid amplification of cDNA ends, cDNA cloning, Prokaryotic expression

卞伟华;;江昌俊;王朝霞. 桃叶片β- 半乳糖苷酶基因全长cDNA克隆及原核表达[J]. 园艺学报, 2006, 33(4): 721-724.

Bian Weihua;;Jiang Changjun;Wang Zhaoxia. Cloning and Expression of β-galactosidase Gene cDNA in Peach[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2006, 33(4): 721-724.

[1]	任菲, 卢苗苗, 刘吉祥, 陈信立, 刘道凤, 眭顺照, 马婧. 蜡梅胚胎晚期丰富蛋白基因CpLEA的表达及抗性分析[J]. 园艺学报, 2023, 50(2): 359-370.
[2]	翟含含, 翟宇杰, 田义, 张叶, 杨丽, 温陟良, 陈海江. 桃SAUR家族基因分析及PpSAUR5功能鉴定[J]. 园艺学报, 2023, 50(1): 1-14.
[3]	袁馨, 徐云鹤, 张雨培, 单楠, 陈楚英, 万春鹏, 开文斌, 翟夏琬, 陈金印, 甘增宇. 猕猴桃后熟过程中ABA响应结合因子AcAREB1调控AcGH3.1的表达[J]. 园艺学报, 2023, 50(1): 53-64.
[4]	邢柱东, 吕福堂, 郭尚敬, 张演义. 新品种‘聊大红金’桃[J]. 园艺学报, 2023, 50(1): 225-226.
[5]	杨兴旺, 王海波, 王莹莹, 王小龙, 王志强, 刘培培, 刘万春, 王孝娣. 中熟抗寒桃新品种‘中农甘爽’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 15-16.
[6]	杨兴旺, 王海波, 王莹莹, 张艺灿, 王宝亮, 刘培培, 史祥宾, 刘万春, 王孝娣. 中熟抗寒桃新品种‘中农白干’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 17-18.
[7]	杨兴旺, 刘凤之, 王海波, 王莹莹, 王志强, 史祥宾, 冀晓昊, 刘万春, 王孝娣. 中熟抗寒桃新品种‘中农寒水蜜’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 19-20.
[8]	杨兴旺, 刘凤之, 王海波, 王莹莹, 张艺灿, 李鹏, 王小龙, 刘万春, 王孝娣. 晚熟抗寒桃新品种‘中农秋香’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 21-22.
[9]	王莹莹, 刘立常, 刘志伍, 杨兴旺, 刘万春, 王孝娣, . 极晚熟桃新品种‘中农冬蜜’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 23-24.
[10]	王莹莹, 刘立常, 刘志伍, 杨兴旺, 刘万春, 王孝娣, . 小果油桃新品种‘中农珍珠’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 25-26.
[11]	吴延军, 刘庆忠, 陈鸿才, 戚行江, 朱东姿, 郑家祥, 曹学敏, 方丹燕. 甜樱桃新品种‘江南锦’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 29-30.
[12]	张晓明, 闫国华, 周宇, 王晶, 段续伟, 吴传宝, 张开春. 甜樱桃砧木新品种‘京春2号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 31-32.
[13]	宋放, 陈奇, 袁炎良, 陈沙, 尹海军, 蒋迎春, . 黄肉猕猴桃新品种‘先沃1号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 47-48.
[14]	齐永杰, 高正辉, 马娜, 王清明, 柯凡君, 陈钱, 徐义流, . 黄肉抗溃疡病猕猴桃新品种‘皖农金果’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 49-50.
[15]	张慧琴, 楼国荣, 陆玲鸿, 古咸彬, 宋根华, 谢鸣. 黄肉中华猕猴桃新品种‘金义’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 51-52.