园艺学报 ›› 2019, Vol. 46 ›› Issue (3): 508-518.doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0097
柴阿丽,陈利达,曹金强,康华军,石延霞,谢学文,李宝聚*
CHAI Ali,CHEN Lida,CAO Jinqiang,KANG Huajun,SHI Yanxia,XIE Xuewen,and LI Baoju*
摘要: 为了明确引起茄子斑驳紫花病的病毒种类,利用小干扰RNA(siRNA)高通量测序技术,结合生物信息学方法寻找茄子样本中的病毒序列,发现存在烟草轻型绿花叶病毒(Tobacco mild green mosaic virus,TMGMV)和番茄斑驳花叶病毒(Tomato mottle mosaic virus,ToMMV)。为了验证该结果,对待测样品中TMGMV和ToMMV的外壳蛋白(coat protein,CP)全长基因进行RT-PCR扩增和系统进化分析,分别得到500 bp的TMGMV-CP和482 bp的ToMMV-CP特异性条带,与GenBank中TMGMV和ToMMV序列相似性分别达到98% ~ 100%和100%,说明待测样品中确实存在TMGMV和ToMMV。对采自山东、河南、辽宁、河北等地的23份疑似斑驳紫花病茄子样品,分别采用特异性引物524-F/R和ToMMV-F/R进行检测。结果显示,所有样品中均含有TMGMV,20份样品中含有ToMMV,复合侵染检出率为86.96%。对茄子、番茄和辣椒幼苗的致病性检测显示,接种后茄子花表现出与田间相同的症状,茄子、番茄和辣椒的叶片表现典型的病毒侵染症状,在接种发病组织中检测到病毒ToMMV和TMGMV。结果表明,茄子斑驳紫花病样中鉴定出TMGMV和ToMMV两种病毒。
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