利用CRISPR/Ca9技术靶向编辑芥蓝BoaZDS

doi:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0426

园艺学报 ›› 2019, Vol. 46 ›› Issue (1): 57-64.doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0426

利用CRISPR/Ca9技术靶向编辑芥蓝BoaZDS

郑爱红*，张芬*，江敏，袁巧，江雷雨，陈清，汤浩茹，孙勃**

（四川农业大学园艺学院，成都 611130）

出版日期:2019-01-25 发布日期:2019-01-25

Targeted Editing of BoaZDS by CRISPR/Ca9 Technology in Chinese Kale

ZHENG Aihong*，ZHANG Fen*，JIANG Min，YUAN Qiao，JIANG Leiyu，CHEN Qing，TANG Haoru，and SUN Bo**

（College of Horticulture，Sichuan Agricultural University，Chengdu 611130，China）

Online:2019-01-25 Published:2019-01-25

摘要/Abstract

摘要：

以芥蓝（Brassica oleracea var. alboglabra）为材料，以ζ–胡萝卜素脱氢酶（ζ-Carotene desaturase，ZDS）基因为目标基因，建立其CRISPR/Cas9基因组编辑体系。在BoaZDS的编码区近5′ 端选择靶位点，构建了CRISPR/Cas9表达载体，通过农杆菌介导的遗传转化方法获得了19个芥蓝转基因阳性植株，Sanger测序分析发现其中13株成功突变，CRISPR/Cas9载体在芥蓝上的突变效率为68.42%，且所有突变植株均表现出明显的白化表型。

关键词: 芥蓝, CRISPR/Cas9, 基因组编辑, ζ–胡萝卜素脱氢酶（ZDS）

Abstract:

The ζ-carotene desaturase（ZDS）gene was selected as the target gene to establish the CRISPR/Cas9 genome editing system in Chinese kale. The target site，near the 5′ end of the coding region of the BoaZDS，was selected，and the CRISPR/Cas9 expression vector was constructed. As a result，a total of 19 transgenic plants were obtained through Agrobacterium-mediated genetic transformation. Sanger sequencing analysis revealed that 13 of them were mutated. The mutation efficiency was 68.42%，and all mutants showed a clear albino phenotype.

Key words: Chinese kale, CRISPR/Cas9, genome editing, ζ-carotene desaturase（ZDS）

中图分类号:

S 635

郑爱红*，张芬*，江敏，袁巧，江雷雨，陈清，汤浩茹，孙勃**. 利用CRISPR/Ca9技术靶向编辑芥蓝BoaZDS[J]. 园艺学报, 2019, 46(1): 57-64.

ZHENG Aihong*，ZHANG Fen*，JIANG Min，YUAN Qiao，JIANG Leiyu，CHEN Qing，TANG Haoru，and SUN Bo**. Targeted Editing of BoaZDS by CRISPR/Ca9 Technology in Chinese Kale[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2019, 46(1): 57-64.

[1]	左鑫, 李铭铭, 李欣容, 苗春妍, 李炎枋, 杨旭, 张重义, 王丰青. CRISPR/Cas9技术在天目地黄RcPDS1基因编辑中的应用[J]. 园艺学报, 2022, 49(7): 1532-1544.
[2]	王丹, 王谧, 刘军, 周晓慧, 刘松瑜, 杨艳, 庄勇. 茄子U6启动子克隆及CRISPR/Cas9介导的基因编辑体系建立[J]. 园艺学报, 2022, 49(4): 791-800.
[3]	李智军, 曾晶, 谭铭喜, 谢景. 芥蓝游离小孢子胚胎发生途径及2,4-D对成胚的影响[J]. 园艺学报, 2021, 48(8): 1605-1618.
[4]	杨锋, 杨钦淞, 高雨豪, 马云晶, 许英, 滕元文, 白松龄. 梨愈伤组织双靶点CRISPR/Cas9基因编辑系统的建立[J]. 园艺学报, 2021, 48(5): 873-882.
[5]	郑好, 张芬, 简越, 黄文莉, 梁莎, 江敏, 袁巧, 汪俏梅, 孙勃. 芥蓝二氢黄酮醇4-还原酶基因BoaDFR的克隆与功能鉴定[J]. 园艺学报, 2021, 48(1): 73-82.
[6]	江定, 李向阳, 刘振翔, 郑岩松, 张华, 李光光. 芥蓝新品种‘金盛芥蓝’[J]. 园艺学报, 2020, 47(S2): 2965-2966.
[7]	姚利晓，何永睿，陈善春*. microRNA 参与柑橘生长发育和抗逆的研究进展[J]. 园艺学报, 2020, 47(5): 995-1008.
[8]	杨禄山，郭晔，胡洋，文颖强*. 利用CRISPR/Cas9系统敲除葡萄中VviEDR2提高对白粉病的抗性[J]. 园艺学报, 2020, 47(4): 623-634.
[9]	冯爽爽1,2，罗嘉翼1,2，朱曦鉴2,4，蒋继滨2,4，黄三文1,3,，张金喆2,. 二倍体马铃薯StBRC1a功能缺失突变体的获得及其功能分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(1): 63-72.
[10]	李桂花1，张天玉2，汤小兵3，陈汉才1,*，黎庭耀1，张艳1. 芥蓝新品种‘紫薹芥蓝’[J]. 园艺学报, 2019, 46(S2): 2777-2778.
[11]	李桂花1，陈汉才1,*，张艳1，黎庭耀1，陈木溪2. 芥蓝新品种‘冬强芥蓝’[J]. 园艺学报, 2019, 46(S2): 2779-2780.
[12]	黎庭耀，李桂花，张艳，沈卓，杨易，陈汉才*. 芥蓝新品种‘秋宝芥蓝’[J]. 园艺学报, 2019, 46(S2): 2781-2782.
[13]	郭晔，万东艳，柴壮壮，王跃进，文颖强*. 利用CRISPR/Cas9敲除葡萄VviPDS1基因的研究[J]. 园艺学报, 2019, 46(4): 623-634.
[14]	邹修平1，范迪2，彭爱红1，何永睿1，许兰珍1，雷天刚1，姚利晓1，李强1，罗克明2,，陈善春1,. CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑[J]. 园艺学报, 2019, 46(2): 337-344.
[15]	杜敏敏1，周明1，邓磊2，李传友2，李常保1,*. 番茄分子育种现状与展望——从基因克隆到品种改良[J]. 园艺学报, 2017, 44(3): 581-600.

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