园艺学报 ›› 2017, Vol. 44 ›› Issue (10): 2001-2007.doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0826
李小琴1,张鹏远1,2,任龙辉1,3,代瑾然1,王建光1,*,陈穗云1,*
LI Xiaoqin1,ZHANG Pengyuan1,2,REN Longhui1,3,DAI Jinran1,WANG Jianguang1,*,and CHEN Suiyun1,*
摘要: 以感病紫茉莉叶片为材料,采用RT-PCR方法克隆落葵皱缩花叶病毒(Basella rugose mosaic virus,BaRMV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因,并构建pET30a-BaRMV-cp原核表达载体。将原核表达载体转化大肠杆菌[Rosetta(DE3)PlysS],成功诱导表达得到大小约为40.0 kD的与预期大小相符的融合蛋白(His-CP)。SDS-PAGE电泳完毕后用0.25 mol ? L-1的KCl溶液染色,将目的蛋白切胶纯化后免疫新西兰大白兔,制备抗血清。间接酶联免疫吸附法(ID-ELISA)检测该抗体的效价为1︰16 000,Western-blotting分析表明该抗体具有很强的特异性。对野外感病紫茉莉和实验室内接种发病本氏烟检测结果也表明,所制备的抗体具有良好的特异性,可用于大规模样品检测。
中图分类号: