细叶百合休眠与解除SSH文库构建及其调控基因的初步筛选

园艺学报 ›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (7): 1476-1483.

细叶百合休眠与解除SSH文库构建及其调控基因的初步筛选

刘芳1,2，王家艳1，周蕴薇1,*

1 东北林业大学园林学院，哈尔滨 150040；2 黑龙江八一农垦大学农学院，黑龙江大庆 163319

出版日期:2014-07-25 发布日期:2014-07-25
基金资助:
中央高校基本科研业务费专项资金项目（DL13CA14）；黑龙江省自然科学基金项目（C201137）；黑龙江省博士后科研启动
金项目（LBH-Q09188）

Preliminary Screening of Dormancy Regulation Related Genes from SSH
Library Constructed Using Dormant and Dormancy Breaking Bulbs of
Lilium pumilum

LIU Fang1,2，WANG Jia-yan1，and ZHOU Yun-wei1,*

1College of Landscape Architecture，Northeast Forestry University，Harbin 150040，China；2College of Agriculture，
Heilongjiang Bayi Agricultural University，Daqing，Heilongjiang 163319，China

Online:2014-07-25 Published:2014-07-25

摘要/Abstract

摘要： 为了验证百合鳞茎休眠解除过程中基因表达的差异性，以细叶百合休眠鳞茎和休眠解除鳞
茎为材料，利用抑制消减杂交技术构建了百合鳞茎休眠及解除正、反向抑制消减文库。文库富集了差异
基因，消减效率符合要求，插入片段集中于250 ~ 1 000 bp 之间。对正、反向文库随机挑选阳性克隆测序，
各获得100 个表达序列标签（EST），在NCBI 上进行BLASTx 分析，并用KOBAS 系统将获得的unigene
定位到Pathways 中。分析结果表明，休眠文库ESTs 功能主要涉及胁迫响应方面，如苯丙氨酸代谢途径、
促分裂素原活化蛋白激酶途径等与休眠有关。休眠解除文库在糖代谢、激素响应及信号转导方面表达量
较高，如亚油酸代谢途径、淀粉及蔗糖代谢途径等参与了休眠解除过程。

关键词: 细叶百合, 鳞茎, 休眠, 抑制消减杂交

Abstract: In order to verify the differences of gene expression in the process of lily bulb dormancy
breaking，two SSH-cDNA libraries were constructed using dormant and dormancy breaking bulbs. The
forward library contained genes preferentially expressed in dormancy breaking bulbs and the reverse
library contained genes preferentially expressed in dormant bulbs. The results showed that differential
express genes were enriched effectively in two libraries，and subtraction efficiency reached the demand.
Most of the length of inserted fragments was 250–1 000 bp. One hundred positive clones were randomly
selected for sequencing from the two libraries. We analyzed ESTs in BLASTx of NCBI and unigenes
positioning in the pathways using KOBAS system. Results indicated that in dormant bulb library，these
functionally known genes were detected in stress response. Phenylalanine metabolism and MAPK
signaling pathway were associated with dormancy. In bulb dormancy breaking library，the function of ESTs involved in sugar metabolism，hormone response and signal transduction，linoleic acid metabolism
and starch and sucrose metabolic pathway was involved in dormancy breaking process.

Key words: Lilium pumilum, bulb, dormancy, suppression subtractive hybridization

中图分类号:

S 682.2

刘芳, 王家艳, 周蕴薇. 细叶百合休眠与解除SSH文库构建及其调控基因的初步筛选[J]. 园艺学报, 2014, 41(7): 1476-1483.

LIU Fang, WANG Jia-Yan, ZHOU Yun-Wei. Preliminary Screening of Dormancy Regulation Related Genes from SSH
Library Constructed Using Dormant and Dormancy Breaking Bulbs of
Lilium pumilum[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2014, 41(7): 1476-1483.

[1]	梁沁, 张延晖, 康开权, 刘瑾航, 李亮, 冯宇, 王超, 杨超, 李永裕. miR168家族进化特性及其在砂梨休眠期的表达模式分析[J]. 园艺学报, 2022, 49(5): 958-972.
[2]	许曈, 邵灵梅, 王小斌, 张润龙, 张凯靖, 夏宜平, 张佳平, 李丹青. 多年生单子叶植物的越冬休眠研究进展[J]. 园艺学报, 2022, 49(12): 2703-2721.
[3]	杨博, 魏佳, 李坤峰, 王程亮, 倪隽蓓, 滕元文, 白松龄. PpyERF060-PpyABF3-PpyMADS71调控乙烯信号通路介导的梨芽休眠进程[J]. 园艺学报, 2022, 49(10): 2249-2262.
[4]	吕学思，张栋，闵芮涵，李世琦，李铮，任梓铭，夏宜平. 外源蔗糖对离体条件下换锦花小鳞茎发生的影响[J]. 园艺学报, 2020, 47(8): 1475-1489.
[5]	许俊旭1，李青竹1，李叶2，杨柳燕1，李心1，王桢1，张永春1,*. 石蒜鳞茎膨大过程中内源激素相关基因的差异表达研究[J]. 园艺学报, 2020, 47(6): 1126-1140.
[6]	吴红，刘春英，付祥梅，盖树鹏，张玉喜*. 牡丹休眠相关基因PsGRASs筛选、克隆和表达特性分析[J]. 园艺学报, 2019, 46(2): 365-374.
[7]	张伟富1，刘莹1,3，孙冷雪1，王璐1，曾建明1，杨亚军1，王新超1，韦朝领2,，郝心愿1,. 茶树CsAIL的克隆及在不同休眠阶段的表达分析[J]. 园艺学报, 2019, 46(2): 385-396.
[8]	董玉惠1，王立霞1，顾启玉1，刘中良2，孙秀东1，刘世琦1,*. 利用转录组测序分析外源GA3解除大蒜气生鳞茎休眠相关基因[J]. 园艺学报, 2019, 46(12): 2335-2346.
[9]	王春夏，尹玥，王志平，严瑞，付麟岚，孙红梅*. 多倍化兰州百合和细叶百合组培苗再生和耐非生物胁迫能力[J]. 园艺学报, 2019, 46(12): 2359-2368.
[10]	黄晓婧1，张珺1，夏惠1,2，邓群仙1，王进1,2，吕秀兰1,2，梁东1,2,*. 葡萄MADS-box转录因子家族全基因组鉴定及表达分析[J]. 园艺学报, 2019, 46(10): 1882-1896.
[11]	孙红梅1,2,*，付麟岚1，王志平1，盖美竹1，王春夏1,2. 基于体细胞胚发生的细叶百合和兰州百合多倍体诱导及鉴定[J]. 园艺学报, 2018, 45(6): 1136-1146.
[12]	马鑫瑞，李亮，刘，杨梦洁，陈洁，梁沁，吴少华，李永裕瑾航. 梨花芽休眠相关miRNA的鉴定和差异表达分析[J]. 园艺学报, 2018, 45(11): 2089-2105.
[13]	温璐华1，高志红1,，霍希美1，庄维兵2，吕林1. H₂O₂在外源GA₄*解除果梅季节性休眠中的信号作用[J]. 园艺学报, 2017, 44(2): 255-267.
[14]	高真真，王东岭，付喜玲，徐功勋，陈修德，李玲，高东升. 油桃开花时间调控基因在花芽休眠过程中的表达分析[J]. 园艺学报, 2016, 43(12): 2347-2358.
[15]	丁安琪1,，冯莹2,，朱里莹1，徐世荣1，秦军1，潘东明1,**. 水仙温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL的克隆与表达分析[J]. 园艺学报, 2016, 43(1): 161-167.