枳抗逆基因PtrZPT2-2 的克隆与表达分析

园艺学报 ›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (1): 9-16.

枳抗逆基因PtrZPT2-2 的克隆与表达分析

刘德春*，吴启*，王玥辰，刘山蓓，刘勇**

江西农业大学农学院园艺系，南昌 330045

出版日期:2014-01-25 发布日期:2014-01-25
基金资助:
国家自然科学基金项目（31260468）；江西省自然科学基金项目（20114BAB214006）；江西农业大学科学研究基金项目（CX201101）

Cloning and Expression Analysis of PtrZPT2-2 from Trifoliate Orange （Poncirus trifoliata）

LIU De-chun*，WU Qi*，WANG Yue-chen，LIU Shan-bei，and LIU Yong**

Department of Horticulture，College of Agronomy，Jiangxi Agricultural University，Nanchang 330045，China

Online:2014-01-25 Published:2014-01-25

摘要/Abstract

摘要： 通过电子克隆和RT-PCR 法从枳[Poncirus trifoliata（L.）Raf.]中克隆到1 个C2H2 型锌指蛋
白家族基因，命名为PtrZPT2-2。该基因编码159 个氨基酸残基，预测蛋白分子量为17.28 kD，等电点为
9.51。PtrZPT2-2 包含两个C2H2 型锌指结构域，在其C–末端含有一个转录抑制结构域EAR/DLN-box
（DLNL）。PtrZPT2-2 与其他植物参与各种非生物胁迫反应的C2H2 型锌指蛋白有较高的一致性。系统发
育树分析表明PtrZPT2-2 与杨树PtaZFP2，矮牵牛ZPT2-12、ZPT2-13，拟南芥ZAT12、ZAT7 亲缘关系较
近。半定量PCR 分析表明，低温、高盐、干旱胁迫和ABA 处理下枳叶、茎、根中PtrZPT2-2 均被诱导上
调。PtrZPT2-2 可能在枳适应低温、高盐、干旱等非生物胁迫和ABA 响应中起着重要作用。

关键词: 枳, C2H2 型锌指蛋白, PtrZPT2-2

Abstract: In the present study，a novel C2H2-type zinc finger protein gene，PtrZPT2-2，was cloned
from trifoliate orange by in silico and RT-PCR approaches. The PtrZPT2-2 encodes a protein of 159 amino
acid residues with a predicted molecular mass of 17.28 kD and an isoelectric point of 9.51. The PtrZPT2-2
protein contains two C2H2-type zinc finger domains，and a putative transcription repression domain
（EAR/DLN-box）at the C-terminus. Phylogenetic analysis showed that the PtrZPT2-2 clustered with
PtaZFP2，ZPT2-12，ZPT2-13，ZAT12 and ZAT7. PtrZPT2-2 shared high identity with other C2H2-type
zinc finger proteins involved in abiotic stress responses. Semi-quantitative PCR analysis showed that
expression of PtrZPT2-2 was upregulated by cold，salt，drought and ABA treatments in leaves，stems and
roots of trifoliate orange seedlings. Our data suggested that PtrZPT2-2 is a new member of the C2H2-type
zinc finger protein genes and may play an important role in response to cold，salt，drought and ABA
stresses in citrus.

Key words: trifoliate orange, C2H2-type zinc finger, PtrZPT2-2

中图分类号:

S 666

刘德春, 吴启, 王玥辰, 刘山蓓, 刘勇. 枳抗逆基因PtrZPT2-2 的克隆与表达分析[J]. 园艺学报, 2014, 41(1): 9-16.

LIU De-Chun, WU Qi, WANG Yue-Chen, LIU Shan-Bei, LIU Yong. Cloning and Expression Analysis of PtrZPT2-2 from Trifoliate Orange （Poncirus trifoliata）[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2014, 41(1): 9-16.

[1]	杜晨晴，吴秀文，闫磊，刘亚林，姜存仓*. 缺硼和低pH对枳苗根系细胞壁组分及细胞中硼分布的影响[J]. 园艺学报, 2018, 45(7): 1272-1282.
[2]	王君秀，袁高鹏，阮科，彭良志，凌丽俐，付行政，淳长品*. 不同pH营养液处理下3种柑橘砧木有机酸分泌的差异[J]. 园艺学报, 2018, 45(6): 1054-1066.
[3]	郭文芳，刘德春，杨莉，庄霞，张涓涓，王书胜，刘勇. 柑橘抗逆基因NAC83的克隆与表达分析[J]. 园艺学报, 2015, 42(3): 445-454.
[4]	姚利晓，王金萍，何永睿，雷天刚，许兰珍，彭爱红，邹修平，陈善春. 枳根cDNA全长文库的构建与分析[J]. 园艺学报, 2015, 42(1): 149-156.
[5]	姚利晓, 何永睿, 许兰珍, 雷天刚, 彭爱红, 邹修平, 陈善春. 应用抑制性消减杂交技术从枳中筛选根特异表达基因[J]. 园艺学报, 2014, 41(12): 2481-2488.
[6]	许兰珍, 彭爱红, 何永睿, 姚利晓, 雷天刚, 刘小丰, 姜国金, 邹修平, 陈善春. 异源韧皮部特异启动子在转基因枳中的表达[J]. 园艺学报, 2014, 41(1): 1-8.
[7]	程春振, 钟, 云, 吴, 波, 阳佳位, 贝学军, 姜, 波, 朱世平, 闫树堂, 张永艳, 曾继吾, 钟广炎. 枳感染柑橘衰退病病毒后的应答基因分析[J]. 园艺学报, 2013, 40(12): 2341-2353.
[8]	曹诣斌;石瑞;陈文荣;郭卫东 . 低温胁迫下佛手和枳乙烯应答因子6（ERF6）表达变化的比较分析 [J]. 园艺学报, 2011, 38(10): 1873-1882.
[9]	宋长年;房经贵;王晨;上官凌飞;章镇. 基于EST库的枳APETALA2基因cDNA克隆及其表达分析[J]. 园艺学报, 2009, 36(6): 799-806.
[10]	王明元;夏仁学;王幼珊;周开兵;王鹏;倪海枝. 缺铁和过量重碳酸盐胁迫下丛枝菌根真菌对枳生长的影响 [J]. 园艺学报, 2008, 35(4): 469-474.
[11]	龚桂芝;洪棋斌;彭祝春;江东;向素琼. 枳属种质遗传多样性及其与近缘属植物亲缘关系的SSR和cpSSR标记分析 [J]. 园艺学报, 2008, 35(12): 1742-1750.
[12]	吴强盛;;王幼珊;夏仁学. 枳实生苗抗旱丛枝菌根真菌菌种比较的研究[J]. 园艺学报, 2006, 33(3): 613-616.
[13]	胡春华;邓子牛;A. Gentile;徐　艳;熊兴耀. 转rol基因枳橙分子鉴定及部分生物学的观测[J]. 园艺学报, 2006, 33(1): 130-133.
[14]	庞晓明邓秀新胡春根. 枳属36份特异种质的AFLP指纹图谱构建与分析[J]. 园艺学报, 2003, 30(4): 394-398.
[15]	杨晓红;李道高;石井孝昭;门屋一臣. 杂草发酵物对枳生长和VA菌根形成的影响[J]. 园艺学报, 2001, 28(4): 336-338.