双孢蘑菇多酚氧化酶的分离、纯化及特性分析

园艺学报 ›› 2012, Vol. 39 ›› Issue (4): 763-768.

双孢蘑菇多酚氧化酶的分离、纯化及特性分析

朱继英, 王健, 王相友

（山东理工大学农业工程与食品科学学院，山东淄博 255049）

出版日期:2012-04-25 发布日期:2012-04-25

Extraction，Purification and Property of Polyphenol Oxidase from Agaricus bisporus

ZHU Ji-Ying, WANG Jian, WANG Xiang-You

（School of Agricultural and Food Engineering，Shandong University of Technology，Zibo，Shandong 255049，China）

Online:2012-04-25 Published:2012-04-25

摘要/Abstract

摘要： 通过分步盐析，DEAE-Cellulose-52阴离子交换层析和Sephadex G-100凝胶柱层析，对双孢蘑菇中的多酚氧化酶（PPO）进行了分离纯化，并对在分离纯化过程中蛋白得率及酶活性进行了测定。最终得到纯化倍数为103.2，比活为566.57 U · mg^-1，蛋白得率为0.47%的酶液。经SDS-PAGE电泳检验，所得到的PPO呈单一蛋白带，分子质量为25.5 kD。利用扫描探针显微镜对该酶的分子形态进行了观察，发现双孢蘑菇中的PPO分子呈椭球状，分子高度在8 ~ 12 nm之间。

关键词: 双孢蘑菇, 多酚氧化酶, 纯化, 分子形态

Abstract: Polyphenol oxidase（PPO）from Agaricus bisporus was extracted and purified by salting-out，DEAE-Cellulose-52 anion exchange chromatography and Sephadex G-100 gel column chromatography. The protein yield and PPO activity were analyzed during purification. The final purification fold，specific activity and protein yield were 103.2，566.57 U · mg^-1 and 0.47%，respectively. The SDS-PAGE analysis showed that the PPO was a single protein band with a molecular weight of about 25.5 kD. The observation by scanning probe microscope showed that the PPO from Agaricus bisporus was ellipsoidal，with a diameter of about 8–12 nm.

Key words: Agaricus bisporus, polyphenol oxidase, purification, molecular shape

中图分类号:

S 646.1⁺1

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