甘蓝SRK的S域及SCR酵母表达载体的构建及其相互作用区段的研究

园艺学报 ›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (8): 1479-1488.

甘蓝SRK的S域及SCR酵母表达载体的构建及其相互作用区段的研究

彭一波1，朱利泉1,*，杨红1，薛丽琰1，罗兵1，吴志刚1，黄丹1，杨昆1，高启国2，李成琼2，任雪松2，王小佳2,*

1西南大学农学与生物科技学院，重庆400716；2重庆市蔬菜学重点实验室，重庆400716

收稿日期:2011-05-10 修回日期:2011-07-14 出版日期:2011-08-25 发布日期:2011-08-25
通讯作者: 朱利泉1,*，王小佳2,*

Studies on the Construction of S Domain of SRK and SCR Gene’s Yeast Expression Vectors and Their Interaction in Yeast Two-hybrid System

PENG Yi-bo1，ZHU Li-quan1,*，YANG Hong1，XUE Li-yan1，LUO Bing1，WU Zhi-gang1，HUANG Dan1，YANG Kun1，GAO Qi-guo2，LI Cheng-qiong2，REN Xue-song2，and WANG Xiao-jia2,*

1College of Agronomy and Biotechnology，Southwestern University，Chongqing 400716，China；2Chongqing Key Laboratory of Olericulture，Chongqing 400716，China

Received:2011-05-10 Revised:2011-07-14 Online:2011-08-25 Published:2011-08-25
Contact: ZHU Li-quan1,*,WANG Xiao-jia2,*

摘要/Abstract

摘要： 为了深入研究S位点受体激酶（SRK）和S位点富含半胱氨酸蛋白（SCR）甘蓝自交不亲和（self-incompatibility，SI）信号传导的雌雄决定因子的相互作用机制，以自交不亲和性高的结球甘蓝为材料，采用酵母双杂交体系，构建pGADT7-eSRKs和pGBKT7-SCRs重组载体，并分别转化到Y187和Y2HGold酵母中，通过SD/-Ade-His-Trp-Leu平板上菌落的形成，PCR以及x-α-gal显色反应鉴定转化到酵母中的两个重组质粒相互作用。结果表明，SRK S域的SRK1及SRK4分别与SCR2相互作用，且初步显示其相互作用区域为SRK第1个外显子的第16 ~ 421 bp的片段和SCR第1 876 ~ 2 068 bp的片段。这既为SRK-SCR相互作用提供了具体证据，也为甘蓝自交不亲和性分子机理的深入研究提供了新内容。

关键词: 甘蓝, SRK, eSRKs基因, SCRs基因, pGADT7载体, pGBKT7载体, 酵母双杂交体系

Abstract: For further study on the interaction of SRK-SCR and between these two determinant factors，Brassica oleracea with high self-incompatibility was used as research materials to construct a group of pGADT7-eSRKs and pGBKT7-SCRs recombinant vectors that were subsequently transformed accordingly into Y187 and Y2HGold yeast. The interaction between these two recombinant plasmids transformed into the yeasts were tested by SD/-Ade-His-Trp-Leu fungal colony formation of plates，PCR and x-α-gal color reactions. The results showed that there existed two kinds of interactions among all interaction assays，which preliminary indicated that their interaction region span 16–421 bp fragment of the first exon of SRK and 1 876–2 068 bp fragment of SCR. These results reconfirm the SRK-SCR interaction，adding some insights into the mechanism of selt incompatibility in Brassica.

Key words: Brassica oleracea, SRK, eSRKs gene, SCRs gene, pGADT7 vector, pGBKT7 vector, yeast two-hybrid system

中图分类号:

S 635

彭一波;朱利泉;杨红;薛丽琰;罗兵;吴志刚;黄丹;杨昆;高启国;李成琼;任雪松;王小佳;. 甘蓝SRK的S域及SCR酵母表达载体的构建及其相互作用区段的研究[J]. 园艺学报, 2011, 38(8): 1479-1488.

PENG Yi-bo;ZHU Li-quan;YANG Hong;XUE Li-yan;LUO Bing;WU Zhi-gang;HUANG Dan;YANG Kun;GAO Qi-guo;LI Cheng-qiong;REN Xue-song;and WANG Xiao-jia;. Studies on the Construction of S Domain of SRK and SCR Gene’s Yeast Expression Vectors and Their Interaction in Yeast Two-hybrid System[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2011, 38(8): 1479-1488.

[1]	韩睿, 钟雄辉, 陈登辉, 崔建, 乐祥庆, 颉建明, 康俊根, . 黑腐病菌效应因子XopR的甘蓝靶标基因BobHLH34的克隆及功能分析[J]. 园艺学报, 2023, 50(2): 319-330.
[2]	崔建, 钟雄辉, 刘泽慈, 陈登辉, 李海龙, 韩睿, 乐祥庆, 康俊根, 王超. 结球甘蓝染色体片段替换系构建[J]. 园艺学报, 2023, 50(1): 65-78.
[3]	吕红豪, 杨丽梅, 方智远, 张扬勇, 庄木, 刘玉梅, 王勇, 季家磊, 李占省, 韩风庆. 春甘蓝新品种‘中甘27’和‘中甘28’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S1): 63-64.
[4]	周娜, 陶伟林, 陆景伟, 郑阳, 胡燕, 潘晓雪. 甘蓝新品种‘渝园春印’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S1): 65-66.
[5]	李强, 蔡玉梅, 苏彦宾, 王英, 顾丽嫱, 赵玉倩. 中早熟甘蓝新品种‘劲绿60’[J]. 园艺学报, 2022, 49(8): 1835-1836.
[6]	陈道宗, 刘镒, 沈文杰, 朱博, 谭晨. 白菜、甘蓝和甘蓝型油菜PAP1/2同源基因的鉴定及分析[J]. 园艺学报, 2022, 49(6): 1301-1312.
[7]	杨丽梅, 方智远. 中国甘蓝遗传育种研究60年[J]. 园艺学报, 2022, 49(10): 2075-2098.
[8]	吕红豪, 杨丽梅, 方智远, 张扬勇, 庄木, 刘玉梅, 王勇, 季家磊, 李占省, 韩风庆. 春甘蓝新品种'中甘26'[J]. 园艺学报, 2022, 49(10): 2285-2286.
[9]	吕红豪, 杨丽梅, 方智远, 张扬勇, 庄木, 刘玉梅, 孙培田, 王勇, 季家磊, 李占省, 韩风庆. 抗枯萎病早熟优质春甘蓝新品种‘YR中甘21’[J]. 园艺学报, 2021, 48(9): 1839-1840.
[10]	张贺翠, 王玉奎, 左同鸿, 刘倩莹, 张以忠, 胡燈科, 谢琴琴, 朱利泉. 甘蓝BoPID基因的克隆与分析[J]. 园艺学报, 2021, 48(6): 1123-1134.
[11]	董艺, 冯羽飞, 许忠民, 王世民, 唐鸿吕, 黄炜. SSR标记遗传距离与结球甘蓝杂种优势的关系分析[J]. 园艺学报, 2021, 48(5): 934-946.
[12]	任文静, 于海龙, 陈立, 张斌, 陈文迪, 方智远, 杨丽梅, 庄木, 吕红豪, 王勇, 季家磊, 张扬勇. 甘蓝Ogura CMS育性恢复基因Rfo的传递效率解析及育种应用[J]. 园艺学报, 2021, 48(11): 2197-2210.
[13]	杨丽梅, 方智远, 张扬勇, 庄木, 吕红豪, 王勇, 季家磊, 刘玉梅, 李占省, 韩风庆. 中国结球甘蓝抗病抗逆遗传育种近年研究进展[J]. 园艺学报, 2020, 47(9): 1678-1688.
[14]	王五宏，汪精磊，李必元，魏庆镇，胡天华，胡海娇，包崇来*. 结球甘蓝抽薹性遗传规律和QTL定位分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(5): 974-982.
[15]	张扬勇，方智远*，杨丽梅，刘玉梅，庄木，吕红豪，李占省，王勇. 露地越冬甘蓝新品种‘中甘1305’[J]. 园艺学报, 2020, 47(3): 607-608.