大白菜AB-81高频再生系统的建立及gus A基因瞬时表达的研究

园艺学报 ›› 2001, Vol. 28 ›› Issue (1): 74-76.

大白菜AB-81高频再生系统的建立及gus A基因瞬时表达的研究

王火旭¹;王关林¹;王晓岩²;方宏筠¹;贾士荣³;唐益雄³;魏毓棠⁴

(¹ 辽宁师范大学生物工程研究所, 大连116029;　² 大连市种子公司, 大连116033;　³ 中国农业科学院生物技术中心, 北京100081;　⁴沈阳农业大学园艺系, 沈阳110161)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2001-02-25 发布日期:2001-02-25

Establishment of Efficient Shoot Regeneration System of Chinese Cabbage (Brassica campestris ssp. pekinensis) Inbred Line‘AB-81’and Studies of Transient Expression of gus A Gene

Wang Huoxu¹, Wang Guanlin¹, Wang Xiaoyan², Fang Hongjun¹, Jia Shirong³, Tang Yixiong³, and Wei Yutang⁴

(¹ Bioengineering Institute of Liaoning Normal University, Dalian 116029;²Dalian seed company, Dalian 116033;³Biotechnology center of the Chinese Agriculture Academy of Science, Beijing 100081;⁴ Department of Horticulture, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2001-02-25 Published:2001-02-25

摘要/Abstract

摘要： 以大白菜自交系AB-81 的子叶和真叶切块为外植体, 建立了高频不定芽离体再生系统。在MS 附加TDZ 0. 2 mg/L , NAA 2. 0 mg/L , AgNO₃ 10 mg/L 和ABA 0. 25 mg/L 的再生培养基上, 子叶和真叶的不定芽再生频率分别达到93. 3%和90. 0%, 每块外植体的不定芽数达3～6 个, 最多达21 个。以EHA105/ pMOG410 为载体转化侵染大白菜AB-81 的子叶, 获得较高gus A 基因瞬时表达频率的条件为: 子叶预培养2～3 d ; 侵染的工程菌液的浓度OD 0. 3～0. 5 ; 侵染时间2～10 min ; 共培养时间2～3 d。

关键词: 大白菜, 子叶, 真叶, 再生, gus A 基因

Abstract: An efficient shoot regeneration systemwas established using cotyledon and leave cuts of the inbred line‘AB-81’as explants. On the MS medium supplemented with 10 mg/L AgNO₃ , 0. 2 mg/L TDZ, 2 mg/L NAA and 0.25mg/L ABA , the regeneration frequency of the cotyledon and leave explants was up to 93. 3% and 90% respectively. The mean number and the most number of shoots per explant was 3 - 6 and 21 respectively. Cotyledons of AB281 were inoculated with Agrobacterium tumefaciens strain EHA105 containing pMOG410 carrying gus A-intron gene. The optimum conditions for the transient expression of gus A gene were as follows : preculture time of 2 - 3 days , bacterium density of OD 0. 3 - 0.5 , infection time of 2 - 10 min , and coculture time of 2 - 3 days.

Key words: Chinese cabbage 〔Brassica campestris L. ssp. pekinensis (Lour) Olsson〕, Cotyledons, Leaves, Regeneration, Gus A gene

中图分类号:

Q 786
S 634

王火旭;王关林;王晓岩;方宏筠;贾士荣;唐益雄;魏毓棠. 大白菜AB-81高频再生系统的建立及gus A基因瞬时表达的研究[J]. 园艺学报, 2001, 28(1): 74-76.

Wang Huoxu;Wang Guanlin;Wang Xiaoyan;Fang Hongjun;Jia Shirong;Tang Yixiong;and Wei Yutang. Establishment of Efficient Shoot Regeneration System of Chinese Cabbage (Brassica campestris ssp. pekinensis) Inbred Line‘AB-81’and Studies of Transient Expression of gus A Gene[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2001, 28(1): 74-76.

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