园艺学报 ›› 2008, Vol. 35 ›› Issue (6): 873-878.
肖望1,2;黄霞1;魏岳荣1;赵杰堂1;戴雪梅1;黄学林1*
XIAO Wang1,2, HUANG Xia1, WEI Yue-rong1, ZHAO Jie-tang1, DAI Xue-mei1 and HUANG Xue-lin1*
摘要: 以'过山香'香蕉的胚性悬浮细胞(Embryogenic cell suspensions,ECS)为起始材料分离原生质体,酶解液的组成为:3.5%纤维素酶R-10、1%离析酶R-10、0.15%果胶酶Y-23、204 mmol/L KCl、67 mmol/L CaCl2和0.41 mol/L甘露醇,原生质体产量为3.1×107个/mL PCV ECS (PCV:packed cell volume,细胞密实体积)。分别以培养基‘A’和‘B’为培养成分在液体浅层培养和看护培养两种培养系统中进行原生质体培养。结果表明:在液体浅层培养系统中,采用培养基‘B’比采用培养基‘A’效果好,原生质体的细胞分裂频率和细胞团形成频率分别约是采用培养基‘A'的3倍和10倍;所获得的培养物为只能增殖而不能进一步分化的非胚性细胞团。在看护培养系统中,采用培养基‘A’与采用培养基‘B’时,细胞分裂频率和细胞团形成频率没有显著地差异;所获得的细胞团具有典型的胚性细胞特征。将从看护培养中获得的细胞团转移到体胚诱导培养基上,培养45 d后,从105个原生质体获得1550个体胚。继续在体胚诱导培养基上培养30 d,7.8%的体胚能萌发。萌发的体胚在MS+0.1%活性炭的培养基中发育成健壮植株,移栽后成活良好。
中图分类号: