Multi#ex—CAPS技术及其在番茄遗传鉴定中的应用

园艺学报 ›› 2003, Vol. 30 ›› Issue (6): 673-677.

Multi#ex—CAPS技术及其在番茄遗传鉴定中的应用

王孝宣杜永臣朱德蔚 Luigi Monti2 S．Grandillo

( 中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京100081； CNR-IMOF，Research Institute for Vegetable and Ornamental Plant Breed—ing，Portici 80055，Italy)

收稿日期:2003-02-24 修回日期:2003-07-25 出版日期:2003-12-25 发布日期:2003-12-25

The Establishm ent of M ultiplex ——CAPS Technique and Its Application for Genetic Characterization in Tomato

W ang Xiaoxuan ， Du Yongchen ， Zhu Dewei ， Luigi Monti2
，S． Grandillo

(‘Institute ofVegetables and Flowers，Chinese Academ)ofAgricultural Science，Beijing 100081，China； CNR-IMOF，Research In—stitulefor Vegetable and Ornamental Plant Breeding，Portici 80055，haly)

Received:2003-02-24 Revised:2003-07-25 Online:2003-12-25 Published:2003-12-25

摘要/Abstract

摘要： ：应用Multiplex—PCR和CAPS(Cleaved amplified polymorphic sequence)原理研究建立了Mutiplex—
CAPS技术。该技术包括：(1)在PCR扩增反应体系加入2对、3对或多对核苷酸引物，经30～40个扩增循
环后得到每对引物的特异扩增片段；(2)应用同一种限制性内切酶消化这些不同引物经扩增后获得的特异
片段；(3)琼脂糖凝胶电泳溴化乙锭染色检测酶切片段长度的多态性。利用该技术对番茄(Lycopersicon es—
cdentum)TA517及其近等基因系的分析表明，Multiplex—CAPS能同时检测2个、3个或多个CAPS标记的多
态性，其效果等同于每个CAPS标记的多态性的叠加，重复性好，分析效率高，降低成本数倍。

关键词: ：番茄, 分子标记, Muhiplex—CAPS, CAPS, Multiplex—PCR

Abstract: An eficient an d reliable technique Multiplex— CAPS was developed for genetic characterization by
combination of two principles Multi—PCR and CAPS (Cleaved amplified polymorphic sequence) in tomato．This
techniqu e included (1)using 2 or 3 or more than 3 primer pairs in the same am plification reaction，after 30—40
thermal cycles the PCR yield diferent products which correspond to each individual primer pair， (2) using only
one enz、111e to digest these diferent PCR products， (3)Using agrose gel electrophoresis to detect polymorphisms
followed by ethidium staining． By comparison with CAPS， Multiplex— CAPS Can detect the polymorphism of 2 or 3
or more than 3 primer pairs in the same am plification reaction at the same time． Th e polymorphism of Multiplex—
CAPS equal exactly the polymorphism supe rimpose of each individual primer pair． Multiplex— CAPS has good re—
producibility with high an alytical efect， lOW cost， lOW labor an d time consuming．

Key words: Tomato, Multiplex— CAPS, CAPS, Multiplex—PCR

中图分类号:

S 641．2

王孝宣杜永臣朱德蔚 Luigi Monti S．Grandillo. Multi#ex—CAPS技术及其在番茄遗传鉴定中的应用[J]. 园艺学报, 2003, 30(6): 673-677.

W ang Xiaoxuan;Du Yongchen;Zhu Dewei;Luigi Monti;S． Grandillo. The Establishm ent of M ultiplex ——CAPS Technique and Its Application for Genetic Characterization in Tomato[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2003, 30(6): 673-677.

[1]	崔建, 钟雄辉, 刘泽慈, 陈登辉, 李海龙, 韩睿, 乐祥庆, 康俊根, 王超. 结球甘蓝染色体片段替换系构建[J]. 园艺学报, 2023, 50(1): 65-78.
[2]	刘艺平, 倪梦辉, 吴芳芳, 刘红利, 贺丹, 孔德政. 荷花花器官性状与SSR标记的关联分析[J]. 园艺学报, 2023, 50(1): 103-115.
[3]	吕红豪, 杨丽梅, 方智远, 张扬勇, 庄木, 刘玉梅, 王勇, 季家磊, 李占省, 韩风庆. 春甘蓝新品种‘中甘27’和‘中甘28’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S1): 63-64.
[4]	王惠哲, 杨瑞环, 邓强, 曹明明, 李淑菊, . 抗黑星病黄瓜新品种‘津冬369’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S1): 85-86.
[5]	杨兴玉, 许林兵, 吴元立, 邱迪洋, 范琳琳, 黄秉智. 香蕉杂交种‘粉杂1号’ABBB基因组鉴定[J]. 园艺学报, 2022, 49(9): 1991-1997.
[6]	张鲁刚, 卢倩倩, 何琼, 薛一花, 马晓敏, 马帅, 聂姗姗, 杨文静. 紫橙色大白菜新种质的创制[J]. 园艺学报, 2022, 49(7): 1582-1588.
[7]	李莎莎, 玉赛赛, 傅雨恒, 骆强伟, 徐炎, 王跃进. 利用胚挽救与分子标记选育葡萄无核抗寒新种质[J]. 园艺学报, 2022, 49(4): 723-738.
[8]	吕红豪, 杨丽梅, 方智远, 张扬勇, 庄木, 刘玉梅, 王勇, 季家磊, 李占省, 韩风庆. 春甘蓝新品种'中甘26'[J]. 园艺学报, 2022, 49(10): 2285-2286.
[9]	吕红豪, 杨丽梅, 方智远, 张扬勇, 庄木, 刘玉梅, 孙培田, 王勇, 季家磊, 李占省, 韩风庆. 抗枯萎病早熟优质春甘蓝新品种‘YR中甘21’[J]. 园艺学报, 2021, 48(9): 1839-1840.
[10]	丁云花, Budahn Holger, 赵泓, 赵岫云. 白菜与甘蓝型油菜—萝卜F染色体附加系回交BC₁中萝卜F染色体的精准鉴定[J]. 园艺学报, 2021, 48(7): 1295-1303.
[11]	李娜, 尚建立, 李楠楠, 周丹, 孔胜楠, 王吉明, 马双武. 西瓜果实形状的分子精准鉴定[J]. 园艺学报, 2021, 48(7): 1386-1396.
[12]	于海龙, 任文静, 方智远, 杨丽梅, 庄木, 吕红豪, 王勇, 季佳磊, 张扬勇. 蔬菜细胞质雄性不育的育性恢复研究进展[J]. 园艺学报, 2021, 48(5): 1031-1046.
[13]	周锐, 解凯东, 王伟, 彭珺, 谢善鹏, 胡益波, 伍小萌, 郭文武, . 依据多倍体形态特征快速高效发掘柑橘四倍体[J]. 园艺学报, 2020, 47(12): 2451-2458.
[14]	刘颖鑫，李沛曈，迟天华，王海滨，管志勇，房伟民，陈发棣，张飞*. 菊花脑 × 甘菊种间F1杂种的鉴定和遗传多样性分析[J]. 园艺学报, 2019, 46(8): 1553-1564.
[15]	王芳1，牛玉清2，黄秉智3，崔广娟1，张珂恒1，曾莉莎1，刘文清1，吕顺1,*，郭权香1，何建齐1. 香蕉与B基因组相关的SCAR标记研究[J]. 园艺学报, 2019, 46(3): 577-589.