园艺学报 ›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (12): 1810-1815.
宋尚伟*; 苗红霞;胡青霞;王娟
SONG Shang-wei*;MIAO Hong-xia;HU Qing-xia; WANG Juan
摘要: 为长期稳定保存银条种质, 建立了玻璃化法超低温保存其茎尖的技术体系。选择继代4次的 银条无菌壮苗, 5 ℃低温驯化14 d; 剥取5 mm的茎尖, 在含有0.5 mol·L - 1蔗糖的MS (无Ca2 + ) 液体培养基预培养1 d; 25 ℃条件下经改良MS + 2PVS2装载20 min; 在- 20 ℃, 95%乙醇浴中以PVS2脱水处理4h; 更换新鲜的PVS3后投入液氮, 保存24 h后取出冷冻管在40 ℃水浴中化冻1 min; 以含有1.2 mol·L - 1蔗糖的改良MS (无Ca2 + ) 溶液洗涤2 次, 每次10 min; 冻存后的茎尖相对存活率超过70%。将冻存后的茎尖转接到再生培养基上, 暗培养20 d后转入正常光照条件下培养, 存活率达63.7%; 继续培养得到正常分化和生长的再生植株, 生根后可移栽成活。
中图分类号: