应用绿色荧光蛋白报告基因优化辣椒的遗传转化体系

园艺学报 ›› 2004, Vol. 31 ›› Issue (6): 737-742.

应用绿色荧光蛋白报告基因优化辣椒的遗传转化体系

杨国顺^1,2;谢丙炎^1*;杨宇红¹;王晓武¹;卢向阳²;蒋芳玲^1,2

(¹ 中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京100081 ; ²湖南农业大学园艺园林学院, 长沙410128)

收稿日期:2003-12-02 修回日期:2004-03-24 出版日期:2004-12-25 发布日期:2004-12-25
通讯作者: 谢丙炎

^{Improvement of Genetic Transformation System by Using GFP as ReporterGene on Pepper}

Yang Guoshun^1,2;Xie Bingyan^1*; Yang Yuhong¹; Wang Xiaowu¹; Lu Xiangyang²; Jiang Fangling^1,2

(¹ Institute of Vegetables and Flowers , Chinese Academy of Agricultural Science , Beijing 100081 , China ; ² Horticultural and Landscape College , Hunan Agricultural University , Changsha 410128 , China)

Received:2003-12-02 Revised:2004-03-24 Online:2004-12-25 Published:2004-12-25
Contact: Xie Bingyan

摘要/Abstract

摘要： 以‘中椒5 号’甜椒和‘湘研10 号’辣椒子叶外植体为试料, 绿色荧光蛋白GFP 基因为报
告基因, 通过观察检测愈伤组织的荧光表达与特异PCR 扩增鉴定, 分析了工程菌液pH 值、共培养基中乙酰丁香酮(AS) 的浓度、共培养时的温度与共培养时间对农杆菌转化辣椒效率的影响。结果表明, 在pH5.2、共培养基中加入AS 200 μmol·L^{- 1} 、23 ℃黑暗条件下, 农杆菌与辣椒子叶共培养5 d , 有利于辣椒子叶的遗传转化,‘中椒5 号’、‘湘研10 号’愈伤组织荧光表达率均达到了40 %。

关键词: 辣椒, 子叶, 绿色荧光蛋白基因, 遗传转化

Abstract: Effect of transferring efficiency of Agrobacterium tumef aciens pH value 、concentration of AS added in co-cultivation medium , temperature during co2cultural stage and days for co-cultivation were studied through PCR
amplification and observation of green fluorescent protein expression by used GFP as reporter gene on cotyledon of ‘Zhongjiao 5’and‘Xiangyan 10’. The results show that when pH value of Agrobacterium solution is 5.2 , transformation efficiency of pepper cotyledon incubated on co-cultivation medium added 200μmol·L ^-1 AS increased significantly under 23 ℃and 5 days dark co-cultivation. The rate of expression of green fluorescent protein are up to 40 % on calli of cotyledon of both‘Zhongjiao 5’and‘Xiangyan 10’.

Key words: Pepper, Cotyledon, Green fluorescent protein, Genetic transformation

中图分类号:

S 641.3

杨国顺;谢丙炎;杨宇红;王晓武;卢向阳;蒋芳玲;. 应用绿色荧光蛋白报告基因优化辣椒的遗传转化体系[J]. 园艺学报, 2004, 31(6): 737-742.

Yang Guoshun;Xie Bingyan;Yang Yuhong;Wang Xiaowu;Lu Xiangyang;Jiang Fangling;. ^{Improvement of Genetic Transformation System by Using GFP as ReporterGene on Pepper}[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2004, 31(6): 737-742.

[1]	罗海林, 袁雷, 翁华, 闫佳会, 郭青云, 王文清, 马新明. 蚕豆萎蔫病毒2号青海辣椒分离物的鉴定与全基因组序列克隆[J]. 园艺学报, 2023, 50(1): 161-169.
[2]	曹亚从, 张正海, 于海龙, 冯锡刚, 张宝玺, 王立浩. 螺丝椒新品种‘中椒409号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 111-112.
[3]	曹亚从, 张正海, 于海龙, 冯锡刚, 张宝玺, 王立浩. 螺丝椒抗病新品种‘中椒209号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 113-114.
[4]	王永平, 胡明文, 朱文超, 廖芳芳, 白立伟, 高刚. 辣椒新品种‘红辣3号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 115-116.
[5]	刘术均, 惠成章, 赵丽丽, 孙永生, 刘爱群. 中早熟辣椒新品种‘美罗卡’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 117-118.
[6]	王飞, 李宁, 尹延旭, 高升华, 徐凯, 姚明华. 辣椒新品种‘鄂椒红元帅’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 119-120.
[7]	李宁, 尹延旭, 高升华, 徐凯, 王飞, 姚明华. 辣椒新品种‘锦绣红117’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 121-122.
[8]	方荣, 陈学军, 周坤华, 袁欣捷, 雷刚, 黄月琴. 辣椒新品种‘赣椒18号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S1): 75-76.
[9]	董桑婕, 葛诗蓓, 李岚, 贺丽群, 范飞军, 齐振宇, 喻景权, 周艳虹. 不同光质补光对辣椒幼苗生长、丛枝菌根共生和磷吸收的影响[J]. 园艺学报, 2022, 49(8): 1699-1712.
[10]	李颖, 王恒明, 徐小万, 徐晓美, 黄智文. 辣椒新品种‘粤椒8号’[J]. 园艺学报, 2022, 49(8): 1837-1838.
[11]	李平平, 张祥, 刘雨婷, 谢志和, 张芮豪, 赵凯, 吕俊恒, 王梓然, 文锦芬, 邹学校, 邓明华. 辣椒63份种质果皮颜色与呈色物质的关系[J]. 园艺学报, 2022, 49(7): 1589-1601.
[12]	邹学校, 朱凡. 辣椒的起源、进化与栽培历史[J]. 园艺学报, 2022, 49(6): 1371-1381.
[13]	傅鸿妃, 聂智星, 陈建瑛. 辣椒新品种‘杭椒12’[J]. 园艺学报, 2022, 49(6): 1395-1396.
[14]	龚明霞, 赵虎, 王萌, 吴星, 赵曾菁, 何志, 黄金梅, 孟生德, 王日升. 广西辣椒病毒的sRNA深度测序和RT-PCR鉴定[J]. 园艺学报, 2022, 49(5): 1060-1072.
[15]	李亚梅, 马福利, 张山奇, 黄锦秋, 陈梦婷, 周军永, 孙其宝, 孙俊. 酸枣愈伤组织转化体系构建及在ZjBRC1调控ZjYUCCA表达中的应用[J]. 园艺学报, 2022, 49(4): 749-757.