园艺学报 ›› 2023, Vol. 50 ›› Issue (8): 1649-1663.doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2022-0721
王荣艳1,2, 李清1,2, 徐灵1, 王秋洁1, 宋昱1,2, 母昌冉1, 唐唯1,2,*(), 郝大海1,2,*()
收稿日期:
2023-03-09
修回日期:
2023-04-28
出版日期:
2023-08-25
发布日期:
2023-08-23
通讯作者:
基金资助:
WANG Rongyan1,2, LI Qing1,2, XU Ling1, WANG Qiujie1, SONG Yu1,2, MU Changran1, TANG Wei1,2,*(), HAO Dahai1,2,*()
Received:
2023-03-09
Revised:
2023-04-28
Published:
2023-08-25
Online:
2023-08-23
摘要:
为了从基因组水平解析马铃薯品种‘合作88’(Solanum tuberosum‘Cooperation 88’)叶绿体基因组多态性和遗传多样性,了解其自交分离群体叶绿体基因组遗传组成和变异,通过对‘合作88’及其30个自交分离群体材料的叶绿体基因组测序组装,并与其他11个茄科物种、拟南芥和水稻的叶绿体基因组序列进行比较分析。结果表明,‘合作88’叶绿体基因组为典型环状结构,长度为160 323 bp,GC含量为38.6%,共注释29个tRNA基因和77个蛋白质编码基因。30个自交后代叶绿体基因组大小在160 331 ~ 162 120 bp之间,注释预测基因数95 ~ 106个,GC含量36.7% ~ 38.6%。进一步分析表明,‘合作88’和其30个自交后代叶绿体类型均为W型,未呈现出多态性。‘合作88’和其自交后代均偏好使用以A/U结尾的密码子,子代叶绿体基因组密码子4种碱基使用频率不同,推断其相对同义密码子使用度、有效密码子数和高频密码子数的差异为叶绿体基因组随机突变和翻译自然选择所导致。此外,16个正向重复序列中有12个存在于‘合作88’及所有自交后代中,另有4个为子代中新出现的。UPGMA聚类分析和共线性分析发现重复序列的出现和基因丢失使得自交后代叶绿体基因组遗传多样性增加。
王荣艳, 李清, 徐灵, 王秋洁, 宋昱, 母昌冉, 唐唯, 郝大海. 马铃薯‘合作88’自交分离群体叶绿体基因组遗传组成分析[J]. 园艺学报, 2023, 50(8): 1649-1663.
WANG Rongyan, LI Qing, XU Ling, WANG Qiujie, SONG Yu, MU Changran, TANG Wei, HAO Dahai. Genetic Analysis of Chloroplast Genome Characteristics of Potato‘Cooperation 88’Selfing Population[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2023, 50(8): 1649-1663.
物种 Species | 基因组大小/bp Genome size | 反向重复长度/bp IR size | GC含量/% GC content | 基因数 Number of genes | 登录号 Accession No. |
---|---|---|---|---|---|
马铃薯Potato | |||||
合作88 Cooperation 88 | 160 323 | 25 575 | 38.6 | 106 | ON921079 |
大西洋 Atlantic | 155 296 | 25 593 | 37.9 | 134 | GWHAORW01000000 |
底西瑞 Desiree | 155 312 | 25 595 | 37.0 | 130 | DQ231562 |
夏波蒂Shepody | 155 296 | 25 593 | 37.9 | 132 | MW307949 |
费乌瑞它 Favorita | 155 296 | 25 593 | 37.9 | 132 | MW307948 |
番茄 Solanum lycopersicum | 155 461 | 25 611 | 37.9 | 134 | DQ347959 |
龙葵 Solanum nigrum | 155 432 | 25 589 | 38.0 | 125 | KM489055 |
茄子 Solanum melongena | 154 289 | 25 566 | 37.9 | 125 | KU682719 |
烟草 Nicotiana debneyi | 156 073 | 25 410 | 38.4 | 129 | MT985319 |
枸杞 Lycium ruthenicum | 154 996 | 25 395 | 37.9 | 111 | MG976805 |
辣椒 Capsicum annuum | 156 781 | 25 783 | 37.7 | 135 | JX270811 |
黄灯笼辣椒 Capsicum chinense | 156 807 | 25 803 | 37.7 | 134 | KU041709 |
拟南芥 Arabidopsis thaliana | 154 478 | 26 264 | 37.9 | 131 | AP000423 |
水稻 Oryza sativa | 134 503 | 20 804 | 39.0 | 148 | MG252500 |
表3 马铃薯‘合作88’与其他茄科植物、拟南芥、水稻叶绿体基因组比较
Table 3 Comparison of chloroplast genomes of potato‘Cooperation 88’,the other 11 Solanaceae,Arabidopsis thaliana and Oryza sativa
物种 Species | 基因组大小/bp Genome size | 反向重复长度/bp IR size | GC含量/% GC content | 基因数 Number of genes | 登录号 Accession No. |
---|---|---|---|---|---|
马铃薯Potato | |||||
合作88 Cooperation 88 | 160 323 | 25 575 | 38.6 | 106 | ON921079 |
大西洋 Atlantic | 155 296 | 25 593 | 37.9 | 134 | GWHAORW01000000 |
底西瑞 Desiree | 155 312 | 25 595 | 37.0 | 130 | DQ231562 |
夏波蒂Shepody | 155 296 | 25 593 | 37.9 | 132 | MW307949 |
费乌瑞它 Favorita | 155 296 | 25 593 | 37.9 | 132 | MW307948 |
番茄 Solanum lycopersicum | 155 461 | 25 611 | 37.9 | 134 | DQ347959 |
龙葵 Solanum nigrum | 155 432 | 25 589 | 38.0 | 125 | KM489055 |
茄子 Solanum melongena | 154 289 | 25 566 | 37.9 | 125 | KU682719 |
烟草 Nicotiana debneyi | 156 073 | 25 410 | 38.4 | 129 | MT985319 |
枸杞 Lycium ruthenicum | 154 996 | 25 395 | 37.9 | 111 | MG976805 |
辣椒 Capsicum annuum | 156 781 | 25 783 | 37.7 | 135 | JX270811 |
黄灯笼辣椒 Capsicum chinense | 156 807 | 25 803 | 37.7 | 134 | KU041709 |
拟南芥 Arabidopsis thaliana | 154 478 | 26 264 | 37.9 | 131 | AP000423 |
水稻 Oryza sativa | 134 503 | 20 804 | 39.0 | 148 | MG252500 |
图1 马铃薯‘合作88’及其自交后代叶绿体基因组T标记多态性检测 M:50 bp DNA ladder marker;LS6:对照品种‘丽薯六号’;CK:空白对照;18 ~ 209:30份自交子代;C88P1:‘合作88’。
Fig. 1 Detection of chloroplast genome polymorphism with T marker in‘Cooperation 88’potato and its selfing progenies M:50 bp DNA ladder marker;LS6:Control cultivar‘Lishu 6’;CK:Blank control;18-209:30 selfing progenies;C88P1:‘Cooperation 88’.
基因分类 Category of genes | 基因分组 Group of genes | 基因名称 Gene name |
---|---|---|
光合作用相关 Photosynthesis related | 光系统ⅠPhotosystemⅠ | psaJ,psaI,psaA,psaB,psaC |
光系统Ⅱ PhotosystemⅡ | psbA,psbB,psbC,psbD,psbE,psbF,psbH,psbI,psbJ,psbK,psbL,psbM,psbN,psbT,psbZ | |
ATP合酶 ATP synthase | atpF,atpH,atpA,atpB,atpE,atpI | |
细胞色素Cytochrome | petA,petL,petG,petB,petD,petN | |
NADH脱氢酶NADH dehydrogenase | ndhJ,ndhK,ndhF,ndhE,ndhG,ndhI,ndhH,ndhC,ndhA | |
二磷酸核酮糖羧化酶大亚基 Rubis CO large subunit | rbcL | |
转录和翻译相关 Transcription and translation related | RNA 聚合酶RNA polymerase | rpoA,rpoB,rpoC1,rpoC2 |
ATP依赖性clp蛋白酶 ATP-dependent clp protease | clpP | |
成熟酶K Maturase K | matK | |
核糖体大亚基Large subunit of ribosome | rpl33,rpl20,rpl36,rpl14,rpl16,rpl22,rpl23(2) ,rpl2,rpl32 | |
核糖体小亚基Small subunit of ribosome | rps16,rps4,rps18,rps11,rps8,rps3,rps19,rps7,rps15,rps2,rps14,rps12 | |
tRNA | trnL-CAA,trnI-CAU,trnR-ACG,trnV-GAC,trnL-UAG,trnN-GUU,trnV-GAC,trnR-ACG,trnN-GUU,trnI-CAU,trnL-CAA,trnP-UGG,trnW-CCA,trnF-GAA,trnM-CAU,trnT-UGU、trnS-GGA,trnfM-CAU,trnG-GCC,trnS-UGA,trnT-GGU,trnC-GCA,trnE-UUC,trnD-GUC,trnY-GUA,trnR-UCU,trnS-GCU,trnQ-UUG,trnH-GUG | |
其他基因 Other genes | 假设叶绿体阅读框架 Hypothetical chloroplast reading frames (ycf) | ycf1,ycf2,ycf3,ycf4 |
C型细胞色素合成基因 C-type cytochrome synthesis gene | ccsA | |
包膜膜蛋白 Envelope membrane protein | cemA | |
乙酰辅酶A羧化酶亚基 Subunit of Acetyl-CoA carboxylase | accD |
表1 马铃薯‘合作88’叶绿体基因组基因功能分类
Table 1 Classification of function genes of chloroplast genome in potato‘Cooperation 88’
基因分类 Category of genes | 基因分组 Group of genes | 基因名称 Gene name |
---|---|---|
光合作用相关 Photosynthesis related | 光系统ⅠPhotosystemⅠ | psaJ,psaI,psaA,psaB,psaC |
光系统Ⅱ PhotosystemⅡ | psbA,psbB,psbC,psbD,psbE,psbF,psbH,psbI,psbJ,psbK,psbL,psbM,psbN,psbT,psbZ | |
ATP合酶 ATP synthase | atpF,atpH,atpA,atpB,atpE,atpI | |
细胞色素Cytochrome | petA,petL,petG,petB,petD,petN | |
NADH脱氢酶NADH dehydrogenase | ndhJ,ndhK,ndhF,ndhE,ndhG,ndhI,ndhH,ndhC,ndhA | |
二磷酸核酮糖羧化酶大亚基 Rubis CO large subunit | rbcL | |
转录和翻译相关 Transcription and translation related | RNA 聚合酶RNA polymerase | rpoA,rpoB,rpoC1,rpoC2 |
ATP依赖性clp蛋白酶 ATP-dependent clp protease | clpP | |
成熟酶K Maturase K | matK | |
核糖体大亚基Large subunit of ribosome | rpl33,rpl20,rpl36,rpl14,rpl16,rpl22,rpl23(2) ,rpl2,rpl32 | |
核糖体小亚基Small subunit of ribosome | rps16,rps4,rps18,rps11,rps8,rps3,rps19,rps7,rps15,rps2,rps14,rps12 | |
tRNA | trnL-CAA,trnI-CAU,trnR-ACG,trnV-GAC,trnL-UAG,trnN-GUU,trnV-GAC,trnR-ACG,trnN-GUU,trnI-CAU,trnL-CAA,trnP-UGG,trnW-CCA,trnF-GAA,trnM-CAU,trnT-UGU、trnS-GGA,trnfM-CAU,trnG-GCC,trnS-UGA,trnT-GGU,trnC-GCA,trnE-UUC,trnD-GUC,trnY-GUA,trnR-UCU,trnS-GCU,trnQ-UUG,trnH-GUG | |
其他基因 Other genes | 假设叶绿体阅读框架 Hypothetical chloroplast reading frames (ycf) | ycf1,ycf2,ycf3,ycf4 |
C型细胞色素合成基因 C-type cytochrome synthesis gene | ccsA | |
包膜膜蛋白 Envelope membrane protein | cemA | |
乙酰辅酶A羧化酶亚基 Subunit of Acetyl-CoA carboxylase | accD |
样本名称 Sample name | 基因组大小/bp Genome size | 基因数 Number of genes | 蛋白质编码基因 Protein-coding gene | 转移RNA tRNA gene | GC含量/% GC content | 反向重复序列/bp Inverted repeat | |
---|---|---|---|---|---|---|---|
IRA | IRB | ||||||
合作88 Cooperation 88 | 160 323 | 106 | 77 | 29 | 38.6 | 25 583 | 25 567 |
C88-18 | 160 331 | 106 | 77 | 29 | 38.6 | 25 599 | 25 579 |
C88-20 | 161 341 | 100 | 76 | 24 | 36.7 | 25 735 | 26 053 |
C88-24 | 161 157 | 100 | 76 | 24 | 37.2 | 25 548 | 26 053 |
C88-35 | 161 150 | 99 | 76 | 23 | 36.9 | 25 532 | 26 049 |
C88-61 | 161 157 | 101 | 76 | 25 | 36.9 | 25 633 | 25 960 |
C88-68 | 161 387 | 100 | 74 | 26 | 36.9 | 25 659 | 26 177 |
C88-69 | 161 220 | 99 | 75 | 24 | 36.8 | 25 733 | 25 930 |
C88-71 | 161 418 | 99 | 75 | 24 | 37.0 | 25 804 | 26 041 |
C88-84 | 161 599 | 100 | 76 | 24 | 36.8 | 25 839 | 26 190 |
C88-88 | 161 663 | 101 | 76 | 25 | 36.9 | 25 856 | 26 196 |
C88-96 | 161 431 | 98 | 74 | 24 | 36.9 | 25 765 | 26 109 |
C88-106 | 161 349 | 99 | 76 | 23 | 36.9 | 25 687 | 26 107 |
C88-107 | 161 375 | 101 | 76 | 25 | 37.1 | 25 656 | 26 163 |
C88-109 | 161 343 | 101 | 76 | 25 | 36.9 | 25 587 | 26 207 |
C88-111 | 161 630 | 100 | 75 | 25 | 37.0 | 26 002 | 26 076 |
C88-115 | 161 226 | 100 | 75 | 25 | 37.1 | 25 426 | 26 197 |
C88-118 | 161 175 | 100 | 75 | 25 | 37.0 | 25 623 | 25 997 |
C88-119 | 161 706 | 99 | 75 | 24 | 36.9 | 25 901 | 26 162 |
C88-132 | 161 326 | 100 | 75 | 25 | 36.9 | 25 697 | 26 041 |
C88-138 | 161 880 | 101 | 74 | 27 | 36.8 | 25 943 | 26 361 |
C88-141 | 161 577 | 101 | 76 | 25 | 36.8 | 25 689 | 26 330 |
C88-143 | 161 832 | 102 | 76 | 26 | 36.8 | 26 095 | 26 163 |
C88-144 | 161 228 | 95 | 73 | 22 | 36.7 | 25 579 | 26 081 |
C88-151 | 161 527 | 101 | 75 | 26 | 36.8 | 25 693 | 26 286 |
C88-157 | 161 568 | 101 | 75 | 26 | 37.0 | 25 718 | 26 286 |
C88-160 | 161 418 | 103 | 77 | 26 | 37.0 | 25 719 | 26 102 |
C88-161 | 162 120 | 100 | 75 | 25 | 36.9 | 26 218 | 26 345 |
C88-182 | 161 806 | 96 | 72 | 24 | 37.2 | 25 768 | 26 492 |
C88-187 | 160 484 | 100 | 74 | 26 | 37.5 | 25 292 | 25 636 |
C88-209 | 161 259 | 99 | 74 | 25 | 37.2 | 25 551 | 26 158 |
表2 马铃薯‘合作88’及其自交后代(C88-)叶绿体基因组比较
Table 2 Comparison of chloroplast genomes in potato‘Cooperation 88’and its selfing progenies(C88-)
样本名称 Sample name | 基因组大小/bp Genome size | 基因数 Number of genes | 蛋白质编码基因 Protein-coding gene | 转移RNA tRNA gene | GC含量/% GC content | 反向重复序列/bp Inverted repeat | |
---|---|---|---|---|---|---|---|
IRA | IRB | ||||||
合作88 Cooperation 88 | 160 323 | 106 | 77 | 29 | 38.6 | 25 583 | 25 567 |
C88-18 | 160 331 | 106 | 77 | 29 | 38.6 | 25 599 | 25 579 |
C88-20 | 161 341 | 100 | 76 | 24 | 36.7 | 25 735 | 26 053 |
C88-24 | 161 157 | 100 | 76 | 24 | 37.2 | 25 548 | 26 053 |
C88-35 | 161 150 | 99 | 76 | 23 | 36.9 | 25 532 | 26 049 |
C88-61 | 161 157 | 101 | 76 | 25 | 36.9 | 25 633 | 25 960 |
C88-68 | 161 387 | 100 | 74 | 26 | 36.9 | 25 659 | 26 177 |
C88-69 | 161 220 | 99 | 75 | 24 | 36.8 | 25 733 | 25 930 |
C88-71 | 161 418 | 99 | 75 | 24 | 37.0 | 25 804 | 26 041 |
C88-84 | 161 599 | 100 | 76 | 24 | 36.8 | 25 839 | 26 190 |
C88-88 | 161 663 | 101 | 76 | 25 | 36.9 | 25 856 | 26 196 |
C88-96 | 161 431 | 98 | 74 | 24 | 36.9 | 25 765 | 26 109 |
C88-106 | 161 349 | 99 | 76 | 23 | 36.9 | 25 687 | 26 107 |
C88-107 | 161 375 | 101 | 76 | 25 | 37.1 | 25 656 | 26 163 |
C88-109 | 161 343 | 101 | 76 | 25 | 36.9 | 25 587 | 26 207 |
C88-111 | 161 630 | 100 | 75 | 25 | 37.0 | 26 002 | 26 076 |
C88-115 | 161 226 | 100 | 75 | 25 | 37.1 | 25 426 | 26 197 |
C88-118 | 161 175 | 100 | 75 | 25 | 37.0 | 25 623 | 25 997 |
C88-119 | 161 706 | 99 | 75 | 24 | 36.9 | 25 901 | 26 162 |
C88-132 | 161 326 | 100 | 75 | 25 | 36.9 | 25 697 | 26 041 |
C88-138 | 161 880 | 101 | 74 | 27 | 36.8 | 25 943 | 26 361 |
C88-141 | 161 577 | 101 | 76 | 25 | 36.8 | 25 689 | 26 330 |
C88-143 | 161 832 | 102 | 76 | 26 | 36.8 | 26 095 | 26 163 |
C88-144 | 161 228 | 95 | 73 | 22 | 36.7 | 25 579 | 26 081 |
C88-151 | 161 527 | 101 | 75 | 26 | 36.8 | 25 693 | 26 286 |
C88-157 | 161 568 | 101 | 75 | 26 | 37.0 | 25 718 | 26 286 |
C88-160 | 161 418 | 103 | 77 | 26 | 37.0 | 25 719 | 26 102 |
C88-161 | 162 120 | 100 | 75 | 25 | 36.9 | 26 218 | 26 345 |
C88-182 | 161 806 | 96 | 72 | 24 | 37.2 | 25 768 | 26 492 |
C88-187 | 160 484 | 100 | 74 | 26 | 37.5 | 25 292 | 25 636 |
C88-209 | 161 259 | 99 | 74 | 25 | 37.2 | 25 551 | 26 158 |
图2 马铃薯‘合作88’及其自交后代C88-18叶绿体基因组图谱 大环内侧基因按顺时针方向转录,大环外侧基因按逆时针转录,不同颜色代表不同的功能组基因。
Fig. 2 Chloroplast genome map of potato‘Cooperation 88’and its selfing progeny C88-18 The genes inside the large circle were transcribed in a clockwise direction,while the genes located outside the large circle were transcribed in a counter-clockwise direction,and different colors represented different functional group genes.
图3 马铃薯‘合作88’(C88P1)及其自交后代(C88-)与其他茄科植物及拟南芥、水稻叶绿体基因组ML进化树
Fig. 3 Chloroplast genome phylogenetic tree of potato‘Cooperation 88’and its progenies,the other 11 Solanaceae species,Arabidopsis thaliana and Oryza sativa Bootstrap value = 1 000.
图4 马铃薯‘合作88’与其他茄科植物叶绿体基因组共线性分析 绿色位置为注释基因,黄色位置为注释CDS,紫色位置为注释tRNA。
Fig. 4 Chloroplasts genomes collinearity analysis of potato‘Cooperation 88’and the other 11 Solanaceae species Green position was annotated gene,yellow position was annotated CDS,purple position was annotated tRNA.
图6 马铃薯‘合作88’及其自交后代叶绿体基因组有效密码子数与第3位同义密码子GC(GC3)含量散点图 绿色方块代表‘合作88’所在位置。
Fig. 6 Scatter plot of the effective number of codon and 3rd synonymous codon GC(GC3)content in the chloroplast genome of potato‘Cooperation 88’and its selfing progenies The green square representing the location of‘Cooperation 88’.
重复 Repeat | 长度/bp Length | 序列 Sequence |
---|---|---|
R1 | 146 | AAAAGAAGACTACCTTTTTTTGTTGTGCTTCGCTAGGTCGAGGTAAGTAAGGTATACGAAGGAAAAGCCTATTTGACAATGAAAGTGACCAAAGATATTCATTTTTCAAAAAACTTTAGCTTGTACACAAATACAGCAGGCCTTTC |
R2 | 27 | ATTAGTACATCATTGAATATACAATTC |
R3 | 42 | CTGTTCAATTGAGACCTTATAATGCAATCGCATTCTCTGGTC |
R4 | 36 | TTCAATTGAGACCTTATAATGCAATCGCATTCTCTG |
R5 | 33 | GAAAGATTCATCTATTTCTTTCTACCATACTAT |
R6 | 16 | GAATCTAGATTTGAGT |
R7 | 60 | ATTAGTACATCATTGAATATACAATTCAAAATTAGTACATCATTGAATATACAATTCAAA |
R8 | 27 | ATTCAATTGAGACCTTATAATGCAATC |
R9 | 27 | TGAGATTTTCACCTCATACGGCTCCTC |
R10 | 26 | ATAAAAGAATCTAAAAATCAATATTC |
R11 | 26 | TTCAATTGAGACCTTATAATGCAATC |
R12 | 25 | TGTATTTTTGATTTATCATCCCTTC |
R13 | 32 | TGGTTTTTTCATGTTGTCAAAGATTTGAACAA |
R14 | 38 | CAATAACCCCTATTTTATTTTCATGTCTTCATAGGGCA |
R15 | 64 | CTTAAACATTGACTTTTACACATGTGCACAACCAAATTCTCCAGGTTCGGGTCCAATTACATAA |
R16 | 36 | AATAAAATAGGGGTTATTGTGCCCTATGAAGACATG |
表4 马铃薯‘合作88’及其自交后代叶绿体基因组重复序列
Table 4 Repeat sequences in chloroplasts genomes of potato‘Cooperation 88’and its selfing progenies
重复 Repeat | 长度/bp Length | 序列 Sequence |
---|---|---|
R1 | 146 | AAAAGAAGACTACCTTTTTTTGTTGTGCTTCGCTAGGTCGAGGTAAGTAAGGTATACGAAGGAAAAGCCTATTTGACAATGAAAGTGACCAAAGATATTCATTTTTCAAAAAACTTTAGCTTGTACACAAATACAGCAGGCCTTTC |
R2 | 27 | ATTAGTACATCATTGAATATACAATTC |
R3 | 42 | CTGTTCAATTGAGACCTTATAATGCAATCGCATTCTCTGGTC |
R4 | 36 | TTCAATTGAGACCTTATAATGCAATCGCATTCTCTG |
R5 | 33 | GAAAGATTCATCTATTTCTTTCTACCATACTAT |
R6 | 16 | GAATCTAGATTTGAGT |
R7 | 60 | ATTAGTACATCATTGAATATACAATTCAAAATTAGTACATCATTGAATATACAATTCAAA |
R8 | 27 | ATTCAATTGAGACCTTATAATGCAATC |
R9 | 27 | TGAGATTTTCACCTCATACGGCTCCTC |
R10 | 26 | ATAAAAGAATCTAAAAATCAATATTC |
R11 | 26 | TTCAATTGAGACCTTATAATGCAATC |
R12 | 25 | TGTATTTTTGATTTATCATCCCTTC |
R13 | 32 | TGGTTTTTTCATGTTGTCAAAGATTTGAACAA |
R14 | 38 | CAATAACCCCTATTTTATTTTCATGTCTTCATAGGGCA |
R15 | 64 | CTTAAACATTGACTTTTACACATGTGCACAACCAAATTCTCCAGGTTCGGGTCCAATTACATAA |
R16 | 36 | AATAAAATAGGGGTTATTGTGCCCTATGAAGACATG |
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